固定化超氧化物歧化酶的制備與性質(zhì)研究.pdf_第1頁
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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文固定化超氧化物歧化酶的制備與性質(zhì)研究姓名:李磊申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):藥物分析學(xué)指導(dǎo)教師:馬長清20080515華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文1固定化超氧化物歧化酶的制備與性質(zhì)研究固定化超氧化物歧化酶的制備與性質(zhì)研究研究生:李磊導(dǎo)師:馬長清教授中文摘要中文摘要固定化酶作為現(xiàn)代生物工程技術(shù)的重要組成部分之一,在醫(yī)學(xué)、分析與分離技術(shù)以及化學(xué)合成等領(lǐng)域有著廣泛的用途。超氧化物歧化酶(superoxid

2、edismutase.簡稱SOD)是美國科學(xué)家Mccd和Fridovich1969年從牛血紅細胞中發(fā)現(xiàn)的一種含有金屬離子的酶,也是至今為止發(fā)現(xiàn)的唯一的以自由基為底物的酶。該酶能專一的清除生物氧化過程中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基(O2.ˉ.ˉ),在維護生物機體內(nèi)自由基產(chǎn)生與清除的動態(tài)平衡過程中起著極其重要的作用。本課題制備了固定化超氧化物歧化酶,測定了固定化酶的活力,并對其理化性質(zhì)進行了系統(tǒng)的研究。一、固定化超氧化物歧化酶的制備及活力測定一、

3、固定化超氧化物歧化酶的制備及活力測定本課題通過對甲殼素的去乙?;苽洳⒓兓瘹ぞ厶牵瑢ぞ厶桥c一定濃度的戊二醛混合交聯(lián),使其發(fā)生氨醛縮合生成活化的載體,將超氧化物歧化酶與活化的載體混合攪拌后抽濾并洗滌,放置于4℃冰箱保存待用。以改進的鄰苯三酚自氧化法為測定酶活力的方法。固定化超氧化物歧化酶活性可達到333U.g1酶活回收率為86.32%二、酶活力測定的兩種方法比較二、酶活力測定的兩種方法比較測定超氧化物歧化酶的活力,常采用經(jīng)典的鄰苯三酚自

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