空場實驗方法改進(jìn)及開心散安神作用研究.pdf

1、目的：本課題以研制完成的空場實驗計算機(jī)圖像實時分析處理系統(tǒng)為基礎(chǔ)，參考國內(nèi)外現(xiàn)有研究方法，建立規(guī)范客觀、科學(xué)合理、更敏感評價安神中藥藥效的指標(biāo)評價體系，并用于經(jīng)典的安神中藥開心散藥理作用的評價，建立適合中醫(yī)藥特點的安神中藥藥理研究方法。 方法： 1．通過人工對正常動物走格數(shù)與計算機(jī)運(yùn)動路程、人機(jī)運(yùn)動時間、人機(jī)運(yùn)動閾值的對比確定人機(jī)指標(biāo)相關(guān)性。 2．選用經(jīng)典的鎮(zhèn)靜藥物研究小鼠在鎮(zhèn)靜模式水平自主活動14個指標(biāo)的有效性

2、，包括對周邊區(qū)、中央?yún)^(qū)及總區(qū)域的運(yùn)動、靜息狀態(tài)等評價指標(biāo)的研究。 3．選用睡眠剝奪模型對抗抑郁模式下的興趣區(qū)進(jìn)行研究，劃分實驗動物探索區(qū)的范圍。 4．運(yùn)用咖啡因和睡眠剝奪建立實驗動物模型，利用空場實驗計算機(jī)圖像實時分析處理系統(tǒng)建立的新指標(biāo)研究安神中藥開心散的藥理機(jī)制。 結(jié)果： 1．運(yùn)動閾值在6.5cm/s時人機(jī)相關(guān)性為91％，相關(guān)性最好。以6.5cm/s的運(yùn)動閾值為基礎(chǔ)通過人工記錄走格數(shù)與電腦記錄的運(yùn)動距

3、離，運(yùn)動時間比較人機(jī)相關(guān)性達(dá)91％和93％。運(yùn)動閾值和運(yùn)動時間相關(guān)性肯定后進(jìn)行興趣物探索實驗的人機(jī)時間比較，其相關(guān)性達(dá)80.49％。以上指標(biāo)良好的人機(jī)相關(guān)性確保了空場實驗計算機(jī)圖像實時分析處理系統(tǒng)實驗結(jié)果的真實、可靠。 2．在鎮(zhèn)靜模式劃分區(qū)域評價小鼠行為研究中小鼠水平自主活動中總路程(TotalDistance，TD)、平均速度(Movement Speed，MS)、運(yùn)動總時間(TotalDuration of Movement

4、，TDM)、周邊區(qū)運(yùn)動路程(Movement Distance inPeripheral Area，MDPA)、周邊區(qū)運(yùn)動時間(Movement Distance inPeripheral Are，MTPA)、靜息總時間(Total Resting Duration，TRD)、周邊區(qū)靜息時間(Resting Duration in Peripheral Area，RDPA)7個指標(biāo)為有效指標(biāo)。周邊區(qū)指標(biāo)可以作為重要的評價項目。相對于總區(qū)

5、域指標(biāo)和周邊區(qū)指標(biāo)，中央?yún)^(qū)指標(biāo)的敏感性較低，但可作為次要指標(biāo)配合評價。 3．抗抑郁模式區(qū)域評價主要集中在探索區(qū)范圍的研究。通過對小鼠自主活動指標(biāo)數(shù)據(jù)的分析，判斷出探索區(qū)域的最佳距離為Margin在3cm之內(nèi)(即距興趣物3cm的區(qū)域)。 4．開心散(KXS)減少中樞多巴胺含量，降低咖啡因小鼠的運(yùn)動量起到鎮(zhèn)靜作用。 5．開心散減少睡眠剝奪后小鼠對興趣區(qū)的探索頻率，縮短跳臺實驗潛伏期，增加安全區(qū)時間，抑制大腦皮層Tch

6、E活性，提高大腦皮層和血漿SOD、CAT的含量，降低MDA的含量。 結(jié)論： 1．空場實驗計算機(jī)圖像實時分析處理系統(tǒng)基礎(chǔ)指標(biāo)良好的人機(jī)相關(guān)性確保實驗數(shù)據(jù)的可靠、真實。 2．鎮(zhèn)靜模式肯定7個有效指標(biāo)，成功建立結(jié)合區(qū)域判斷中藥鎮(zhèn)靜作用的新方法。 3．成功劃定興趣區(qū)的范圍，為安神中藥的研究提供敏感的行為學(xué)范圍。 4．開心散(KXS)通過對咖啡因小鼠腦內(nèi)多巴胺在突觸前后含量的調(diào)節(jié)表現(xiàn)出明顯的鎮(zhèn)靜作用。