海帶多糖的提取及生物活性研究.pdf

1、海帶，褐藻門海帶屬，我國大規(guī)模養(yǎng)殖的經(jīng)濟型海藻。福建省是我國海帶主產(chǎn)區(qū)，福建霞浦、連江、莆田均盛產(chǎn)海帶。海帶作為“藥食同源”類海藻其藥學(xué)功效在諸多藥學(xué)典籍中記載?，F(xiàn)代科學(xué)研究表明，多糖是海帶主要的功效成分之一，具有抗氧化、抗動脈粥樣硬化、抗凝血、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)活性。本文立足福建優(yōu)勢海帶資源，對海帶活性多糖進(jìn)行分離純化，并研究其組成及生物學(xué)活性。
　　本課題采用水提醇沉法獲得海帶粗多糖WPS，得糖率為2.5％。采用離子交換

2、法粗多糖WPS進(jìn)行分離純化，得到粗組分WPS-1，進(jìn)一步采用凝膠柱層析法純化后得到多糖純化組分WPS-1-2。經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳法分離，鑒定WPS-1-2為分子量分布均一的純化多糖。HPLC檢測其分子量為282 KDa?；瘜W(xué)組成分析結(jié)果表明，海帶多糖純化組分WPS-1-2是硫酸酯化多糖，其多糖含量為92.3%，硫酸根含量為10.4%。采用RP-HPLC法檢測單糖組成，結(jié)果表明海帶多糖純化組分WPS-1-2主要由巖藻糖、半乳糖和甘露糖組成，

3、其摩爾比為3.97:3.83:1。
　　生物活性實驗結(jié)果表明，海帶多糖具有顯著抗氧化活性。經(jīng)分離純化后海帶多糖純化組分WPS-1-2總抗氧化能力提高，是其粗多糖總抗氧化力的2倍。此外，多糖純化組分 WPS-1-2對超氧陰離子和羥自由基均有顯著清除活性。當(dāng)多糖純化組分濃度為1 mg/mL時，其對超氧陰離子清除率為95%，與相同濃度下Vitamin C對超氧陰離子清除率相當(dāng)。當(dāng)多糖純化組分濃度達(dá)到3 mg/mL時，對羥自由基清除率達(dá)到

4、93%，高于相同濃度下Vitamin C對羥自由基清除率。
　　海帶多糖純化組分 WPS-1-2可抑制過氧化氫誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖，其最大增值抑制率為73%，且呈量效相關(guān)性。細(xì)胞形態(tài)觀察結(jié)果表明，海帶多糖純化組分 WPS-1-2通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖。明膠酶譜分析結(jié)果顯示，海帶多糖純化組分WPS-1-2對血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)MMPs蛋白酶活性具有抑制作用，顯著抑制與血管平滑肌細(xì)胞遷移活性相關(guān)的MMP2蛋白酶活性。丙