野薔薇根多糖的提取、純化及生物活性研究.pdf

1、本文選野薔薇根(Rosa Multiflora Thunb)為原料，以野薔薇根多糖為研究對(duì)象,較系統(tǒng)地研究了其提取、分離純化的工藝條件。通過對(duì)野薔薇根多糖的抗氧化性及抑菌功能進(jìn)行了初步研究，為其在食品、醫(yī)藥及保健品等方面的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下：
　?。?）考察不同提取方法對(duì)野薔薇根多糖得率的影響。分別采用熱水提取法、微波法、超聲波法、超聲微波法、酶解法和超聲微波法酶解協(xié)同法提取野薔薇根多糖，并設(shè)計(jì)響應(yīng)曲面法優(yōu)化超聲-微波輔助

2、提取和超聲微波法酶解協(xié)同法提取的最佳工藝。結(jié)果表明，超聲-微波輔助提取和超聲微波法酶解協(xié)同法提取的得率最高。超聲-微波輔助法提取野薔薇根多糖的最佳工藝條件為:提取時(shí)間22min，微波功率317W，提取溫度81℃，料液比32:1（mL/g），實(shí)測(cè)的多糖得率為6.10mg/g；超聲微波法酶解協(xié)同法提取野薔薇根多糖的最佳工藝條件為：纖維素酶添加量1.15％（酶活為40U/mg)、pH值5.72、提取溫度81.19℃、液料比12.56:1(mL

3、/g)。在此條件下，野薔薇根多糖的得率為10.48mg/g。
　?。?）篩選野薔薇根多糖脫蛋白的最佳工藝。以蛋白去除率為主要考察指標(biāo)，比較了Sevag法、TCA法(三氯乙酸法)、酶法及TCA-酶結(jié)合法對(duì)野薔薇根多糖脫蛋白率的效果，并采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化TCA法脫蛋白的最佳工藝。結(jié)果，優(yōu)化后的TCA法脫蛋白最佳工藝為:TCA質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.9%、體積比1:1、靜置時(shí)間70min。在此條件下，蛋白去除率為75.92%，多糖損失率為22.57

4、%。
　?。?）探討雙氧水法脫色野薔薇根多糖的最佳工藝條件。用雙氧水法脫色野薔薇根多糖，通過響應(yīng)曲面法確定野薔薇根多糖脫色的最佳工藝條件。雙氧水法對(duì)野薔薇根多糖的最佳脫色工藝條件為:H2O2體積分?jǐn)?shù)35.0%、pH9.0、脫色時(shí)間4.5h，此時(shí)多糖脫色率和保留率分別為95.48%和75.17%。
　?。?）建立野薔薇根多糖分離純化的方法，利用DEAE-52纖維素對(duì)野薔薇根多糖進(jìn)行分離純化，并優(yōu)化其工藝。結(jié)果，最佳分離純化工藝

5、參數(shù)為：離子強(qiáng)度為：水、0.1mol/L和0.3mol/L NaCl，DEAE-52纖維素添加量30g、流速30mL/h；經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析得到的三個(gè)組分RMTP-1、RMTP-2及RMTP-3通過凍融實(shí)驗(yàn)、紫外光譜鑒定為均一性的野薔薇根多糖組分。紫外光譜分析結(jié)果表明該多糖組分不含核酸和蛋白質(zhì)。
　?。?）通過理化性質(zhì)研究，野薔薇根多糖RMTP-1和RMTP-2為不含蛋白質(zhì)及酚類物質(zhì)、具有多糖類化合物的通性。紅外光譜分析

6、表明，RMTP-1和RMTP-2都具有多糖的特征吸收峰。通過氣質(zhì)聯(lián)用法（GC-MS）測(cè)定RMTP-1、RMTP-2的單糖組成：RMTP-1主要由木糖、果糖及甘露糖組成；RMTP-2主要由木糖和果糖組成。
　?。?）采用化學(xué)方法對(duì)野薔薇根多糖進(jìn)行體外抗氧化活性測(cè)定，與VC進(jìn)行了比較，并采用平板打孔法和試管稀釋法對(duì)野薔薇根多糖進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，野薔薇根多糖具有一定的抗氧化活性，野薔薇根多糖的抗氧化性略低于VC，并在一定濃度范