巰基蛋白酶水解β-酪蛋白-茶黃素復(fù)合膜的研究.pdf

1、目的：考察三種巰基蛋白酶（木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶）水解去磷酸化的牛乳β-酪蛋白（dephosphorylated bovine milkβ-casein,β-CN(DP)）/茶黃素（theaflavin, TF）復(fù)合膜的效率及水解后殘存膜再次吸附TF的能力。
　　方法：在消散因子石英微天平（quartz crystal microbalance with dissipation, QCM-D）芯片表面自組裝單分子β-

2、CN(DP)膜并在其上吸附TF，建立β-CN(DP)/TF復(fù)合膜。向QCM-D測量池中分別通入木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶，觀察膜水解的時間（Δt）與頻率改變（ΔF）圖形。運(yùn)用玻爾茲曼方程對ΔF和Δt進(jìn)行擬合，求得水解效率（1/C），比較不同酶水解復(fù)合膜的效率之間的差異。通過原子力顯微鏡和接觸角測量儀表征水解前后復(fù)合膜的均方根粗糙度、形貌和親疏水性。對不同酶水解后的殘存膜行再次吸附TF實(shí)驗(yàn)，并與膜首次吸附 TF的相關(guān)參數(shù)（Δm、

3、Δh）比較。
　　結(jié)果：弗倫德利希等溫線則更好地描述TF在β-CN(DP)膜表面的吸附行為。三種酶的水解效率為無花果蛋白酶>木瓜蛋白酶>菠蘿蛋白酶（P<0.05）。殘存膜的均方根粗糙度無花果蛋白酶<木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶（P<0.05），木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶之間的粗糙度差別則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與首次吸附TF相比，殘存膜上再次吸附的TF的質(zhì)量和厚度明顯減?。≒<0.05），但不同酶水解后的殘存膜再次吸附TF的質(zhì)量和厚度