基于治未病理論的“正常體質-腎虛體質-腎虛證候”唾液動態(tài)變化研究.pdf

1、目的:比較“正常體質——腎虛體質——腎虛證候”動態(tài)演變過程中唾液生化指標及代謝組的變化，尋找腎藏象相關疾病發(fā)生發(fā)展過程中可能的生物標志物，探索其預防靶標，為臨床開展相關疾病無創(chuàng)傷診斷技術和早期防治研究奠定基礎。
　　方法:12只孕鼠，隨機分為Ⅰ、Ⅱ兩組，其中Ⅰ組6只孕鼠孕期不恐嚇，正常喂養(yǎng)，分娩后隨機抽取20只仔鼠作為正常對照組和腎虛證候模型組，每組10只，均為雌雄各半。Ⅱ組6只孕鼠根據(jù)“恐傷腎”的理論，采用“貓嚇鼠”的刺激方法，

2、從妊娠第2天開始給予恐嚇直到仔鼠出生，由此使仔鼠先天不足，制作先天不足腎虛體質動物模型。隨機抽取10只雌雄各半仔鼠作為腎虛體質模型組。各組仔鼠正常條件喂養(yǎng)6周后，腎虛證候模型組每只每天肌肉注射氫化可的松25mg/kg體重，正常對照組和腎虛體質模型組注射等量的生理鹽水，連續(xù)10天。造模結束稱重后停藥，所有動物乙醚麻醉，腹腔注射0.2％匹魯卡品促進唾液分泌，收集大鼠唾液，進行PH值檢測，生化指標檢測及UPLC-TOF-MS代謝組學檢測。大鼠

3、腮腺進行病理組織學觀察。
　　結果:①一般狀況:正常對照組大鼠皮毛色白光亮潤澤，反應靈敏，飲、食、尿量正常，活動正常。腎虛體質模型組仔鼠表現(xiàn)為體積較小，體重明顯輕于其他組（P＜0.05）。身長相對較短，毛發(fā)稀疏，易驚，食量較小，與腎虛體質判斷依據(jù)相符。腎虛證候模型組大鼠注射氫化可的松后出現(xiàn)體重減輕、活動明顯減少、食量下降，反應遲鈍、卷曲拱背和體毛稀疏枯黃等癥狀，個別出現(xiàn)掉毛現(xiàn)象，與腎虛證候判斷依據(jù)相符。第八周腎虛體質組與腎虛證候組

4、大鼠體重均低于正常對照組，有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。②與正常對照組比較，腎虛體質組、腎虛證候組大鼠唾液PH值均明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。腎虛證候組與腎虛體質組比較無統(tǒng)計學意義。③大鼠唾液生化指標檢測發(fā)現(xiàn)，與正常對照組相比，腎虛體質組大鼠唾液CK、ALT、AST、ALP、TP等降低，K、P、AMY等升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），腎虛證候組大鼠CL、CK、ALT、AST、ALP、TP等降低，K、P、AMY

5、等升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。④大鼠唾液腮腺組織病理學檢測顯示，與正常對照組腮腺病理組織相比較，腎虛體質組腮腺組織漿液腺泡不同程度變形，腺泡排列紊亂，腺細胞內分泌顆粒減少，閏管減少或消失。腎虛證候組腮腺組織小葉間隔增大，腺泡體積減小，腺細胞胞質濃縮，基底紋模糊。⑤大鼠唾液UPLC-TOF-MS代謝組學檢測結果顯示，與正常對照組比較，腎虛體質組唾液中α-亞麻酸、γ一亞麻酸、十八碳三烯酸含量升高，腎虛證候組大鼠唾液中環(huán)磷酰胺含

6、量升高，二十碳五烯酸含量下降，二高γ一亞麻酸含量下降。與腎虛體質組相比，腎虛證候組大鼠唾液酪氨酸酶含量升高。這些物質可能為腎藏象相關疾病發(fā)生發(fā)展過程中的生物標志物。
　　結論:伴隨著“正常體質——腎虛體質——腎虛證候”動態(tài)演變過程，唾液PH值、生化指標、代謝物及腮腺病理組織均發(fā)生了相應的變化，說明在腎臟不同的生理病理狀態(tài)下，唾液會隨之發(fā)生變化，進一步闡釋了“腎在液為唾”理論的科學內涵，也為尋找疾病發(fā)生發(fā)展過程中可能的生物標志物，探