mitoKATP通道在瑞舒伐他汀聯(lián)合IPO減輕在體糖尿病大鼠心肌IRI中的作用.pdf

1、研究背景：臨床及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究均顯示，他汀預(yù)處理/后處理可明顯減輕心肌缺血再灌注損傷（IRI），但對(duì)于是否減輕糖尿病IRI所知甚少。晚近有研究表明，對(duì)在體2型糖尿?。═2DM）大鼠的IRI中瑞舒伐他?。≧SV）可加強(qiáng)缺血后處理（IPO）的保護(hù)作用，其機(jī)制可能是通過(guò)PI3K/Akt/eNOS途徑，但確切機(jī)制仍罕見(jiàn)于國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道。
　　 目的：本研究通過(guò)觀察RSV聯(lián)合IPO對(duì)T2DM大鼠心肌IRI的保護(hù)作用，以期回答：1.RSV后處

2、理聯(lián)合IPO是否能明顯減輕在體T2DM大鼠的ＩＲＩ損傷？2.此為線粒體ATP敏感性鉀通道（mitoKATP通道）開(kāi)放還是細(xì)胞膜ATP敏感性鉀通道（sarcKATP通道）開(kāi)放起主要作用？3 瑞舒伐他汀后處理(RPO)+IPO組+KATP通道非特異性開(kāi)放劑減輕在體T2DM大鼠的ＩＲＩ損傷是否優(yōu)于RPO+IPO組？4.干預(yù)RPO聯(lián)合IPO的作用是否影響eNOS蛋白表達(dá)量。
　　 方法：清潔級(jí)雄性Wistar大鼠100只，體重200±1

3、0g，建立2型糖尿病大鼠模型，選取最終成模大鼠81只并隨機(jī)分成9組(每組9只)：（1）假手術(shù)組(Sham組)，冠脈只穿線不結(jié)扎；（2）IRI組，結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）45min，之后持續(xù)再灌注120min；（3）瑞舒伐他汀后處理+缺血后處理組（RPO+IPO組），結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）45min，瑞舒伐他汀10mg/kg于再灌注前3min頸外靜脈緩慢推注，再灌注前同時(shí)給予10s R／10s I，重復(fù)3次，之后持續(xù)再灌

4、注120min；（4）RPO+IPO+5-HD組（5-HD組），結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）45min，5-HD10mg/kg及瑞舒伐他汀10mg/kg分別于再灌注前10min及3min頸外靜脈緩慢推注，之后持續(xù)再灌注120min；（5）RPO+IPO+二氮嗪組（二氮嗪組），結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）45min，二氮嗪12.5mg/kg及瑞舒伐他汀10mg/kg分別于再灌注前10min及3min頸外靜脈緩慢推注，再灌注前同時(shí)予

5、給予10s R／10s I，重復(fù)3次，之后持續(xù)再灌注120min；（6）RPO+IPO+HMR-1098組（HMR-1098組），結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）45min，HMR-1098 5mg/kg及瑞舒伐他汀10mg/kg分別于再灌注前10min及3min頸外靜脈緩慢推注，再灌注前同時(shí)予給予10s R／10s I，重復(fù)3次，之后持續(xù)再灌注120min；（7）RPO+IPO+克羅卡林組（克羅卡林組）:結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD

6、）45min，克羅卡林56μg/kg及瑞舒伐他汀10mg/kg分別于再灌注前10min及3min頸外靜脈緩慢推注，再灌注前同時(shí)予給予10s R／10s I，重復(fù)3次，之后持續(xù)再灌注120min；（8）RPO+IPO+格列苯脲組（格列苯脲組），結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）45min，格列苯脲5mg/kg及瑞舒伐他汀10mg/kg分別于再灌注前10min及3min頸外靜脈緩慢推注，再灌注前同時(shí)予給予10s R／10s I，重復(fù)3次，之后

7、持續(xù)再灌注120min；（9）RPO+IPO+尼可地爾組（尼可地爾組），結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）45min，尼可地爾0.3mg/kg及瑞舒伐他汀10mg/kg分別于再灌注前10min及3min頸外靜脈緩慢推注，再灌注前同時(shí)予給予10s R／10s I，重復(fù)3次，之后持續(xù)再灌注120min。 TTC染色測(cè)定心肌危險(xiǎn)區(qū)面積及心肌梗塞區(qū)面積；電鏡觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)；ELASA試劑盒測(cè)定血清肌鈣蛋白水平；Western blot分別測(cè)

8、定心肌組織磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合酶（p-eNOS）和總內(nèi)皮型一氧化氮合酶（t-eNOS）蛋白表達(dá)量。
　　 結(jié)果：（1）與IRI組比較， RPO+IPO組、二氮嗪組、HMR-1098組、克羅卡林組和尼可地爾組的心梗面積均明顯減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。5-HD組和格列本脲組心梗面積不但與IRI組無(wú)明顯差異（P均＞0.05），而且明顯大于RPO+IPO組、二氮嗪組、HMR-1098組、克羅卡林組和尼可地爾組，差異有統(tǒng)

9、計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。（2）Sham組大鼠心肌細(xì)胞大部分線粒體結(jié)構(gòu)正常，線粒體數(shù)目多而密集, 結(jié)構(gòu)完整，嵴突長(zhǎng)而豐富,內(nèi)清晰可見(jiàn)，較規(guī)則、致密。IRI組、5-HD組及格列本脲組心肌細(xì)胞大部分線粒體基質(zhì)呈斑點(diǎn)狀或空泡狀，嵴突排列紊亂，可見(jiàn)嵴斷裂、變短、稀疏、消失，少數(shù)線粒體膜破裂。RPO+IPO組、二氮嗪組、HMR-1098組、克羅卡林組及尼可地爾組心肌細(xì)胞大部分線粒體總體結(jié)構(gòu)基本完整，偶見(jiàn)基質(zhì)顆粒喪失或輕度腫脹；少數(shù)線粒體基質(zhì)電子

10、密度稍降低，可見(jiàn)嵴突變短、數(shù)目減少，但嵴斷裂較少見(jiàn)，線粒體膜完整。（3）與IRI組比較，RPO+IPO組、二氮嗪組、HMR-1098組、克羅卡林組和尼可地爾組的血清cTnT含量均明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。5-HD組和格列本脲組血清cTnT含量不但與IRI組無(wú)明顯差異（P均＞0.05），而且明顯高于RPO+IPO組、二氮嗪組、HMR-1098組、克羅卡林組和尼可地爾組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）；（4）RPO+

11、IPO組、5-HD組及二氮嗪組的p-eNOS蛋白表達(dá)量均明顯高于Sham組和IRI組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）；IRI組的p-eNOS相對(duì)灰度值較Sham組稍低，差別具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。T-eNOS蛋白表達(dá)量各組間無(wú)明顯差異。
　　 結(jié)論：瑞舒伐他汀后處理聯(lián)合缺血后處理：1.可明顯減輕在體T2DM大鼠的ＩＲＩ損傷。2.mitoKATP通道開(kāi)放在此作用中起主導(dǎo)地位。3.在兩后處理基礎(chǔ)上加用KATP通道非特異性開(kāi)