基于納米金的三聚氰胺與DNA比色分析研究.pdf

1、納米金具有優(yōu)良的光學性能、電學性能、生物相容性以及表面易被修飾的特點，在免疫標記、疾病的診斷與治療、藥物檢測等領域具有廣闊的應用前景?；诩{米金的比色傳感一般步驟為：建立一種納米金反應體系，使其與靶物質(zhì)特異性結(jié)合，從而發(fā)生物理、化學或者生物反應，并通過轉(zhuǎn)換元件，輸出電信號或者光信號，最終完成對靶物質(zhì)的分析檢測。
　　目前，有關食品安全檢測的方法種類較多，傳統(tǒng)的檢測方法面臨著耗時、耗力、檢測成本高的難題，導致我國被檢測的食品不足食品

2、生產(chǎn)總量2％，檢測率極低。納米金比色方法具有高通量、簡單、快速靈敏的特點，能夠更適用于食品安全的現(xiàn)場檢測。本研究從食品安全現(xiàn)狀著手，針對日益突出的食品摻假問題進行了深入的研究工作。通過制備可控、穩(wěn)定以及尺寸均一的納米金球/棒，篩選出其中的一種納米金顆粒作為比色檢測工具，并進一步將納米金球應用到三聚氰胺以及摻假肉的檢測上。建立了無標記納米金比色檢測三聚氰胺的方法以及巰基標記納米金檢測摻假肉的方法。
　　（一）納米金球/納米金棒的制備

3、：通過控制Na3Ct/HAuCl4的摩爾比值，制備了不同分散度、不同尺寸的納米金球。通過控制硝酸銀的用量，制得兩種長徑比不同的金納米棒。將所制得的納米金顆粒用紫外可見光譜、TEM等表征，選擇一組形貌可控，穩(wěn)定性良好，尺寸均一的納米金球，供實驗比色檢測用。
　?。ǘo標記納米金比色檢測三聚氰胺體系的建立：未經(jīng)修飾的納米金能夠與三聚氰胺在共價配位鍵的作用下相互吸引，從而使得納米金相互靠近,最終可導致彼此間距減小而發(fā)生聚沉。在此基礎上

4、，通過檸檬酸根與硫酸氫根配基的交換，減小了納米金表面的空間位阻，并進一步優(yōu)化反應溫度、反應時間、pH等條件。在最佳反應條件下，反應體系檢測范圍為0.08~12 mg/kg，線性相關系數(shù)為0.993，檢測回收率范圍是84%~98%。試驗操作簡便，靈敏度高。當牛奶中三聚氰胺濃度超過8 mg/kg時，可用肉眼檢測。
　　（三）巰基標記納米金識別肉制品中的雞源性成分：基于雞的 D-loop基因，設計一端含巰基的雞的特異性引物。以試樣提取的