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1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文NaCl和KCl脅迫對(duì)堿蓬生長(zhǎng)及液泡膜質(zhì)子泵活性的效應(yīng)姓名:楊明峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:王寶山2002.4.30NaCI.1IKCI助邊刀粼庵士炙及腸觸裂質(zhì)子刃活世功戎應(yīng)NaCI和KCl脅迫對(duì)堿蓬生長(zhǎng)及液泡膜質(zhì)子泵活性的效應(yīng)楊明峰(山東師范大學(xué)生命科學(xué)院250014)2002.4.18摘要在鹽漬條件下,堿蓬的根和地上部分在生長(zhǎng)、離子積累、質(zhì)子泵活性、VH十一ATPase伽退的表等幾個(gè)方面存在明顯
2、差異,表明鹽脅迫下地上部分和根在耐鹽方面的作用和耐鹽機(jī)理不同,顯著差別刁鹽生植物堿二者共同影響著植物的耐鹽性。NaCl和KCl對(duì)堿蓬上述各方面的效應(yīng)也有本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯縉aCl和KCl對(duì)堿蓬生長(zhǎng)及液泡膜質(zhì)子泵活性的效應(yīng),以蓬為材料分別用NaCl和KCl處理,測(cè)定根和地上部分的有關(guān)生理指標(biāo),通過(guò)蔗糖密度梯度離心提取了堿蓬根和地上部分的液泡膜微囊,測(cè)定了VHATPaseVHPPase活性,并進(jìn)行Westernblot分析以確定VHATPas
3、e各亞基表達(dá)情況,主要結(jié)果如下:1NaCI處理對(duì)堿蓬根和地上部分生長(zhǎng)和液泡膜質(zhì)子泵的效應(yīng)r八.1生長(zhǎng)和離子積累從堿蓬地上部分鮮重和干重變化趨勢(shì)看,低鹽脅迫(200mmolL)明顯促進(jìn)堿蓬地上部分的生長(zhǎng),高鹽脅迫(400mmoULNaCl)與低鹽脅迫相比抑制堿蓬地上部分的生長(zhǎng)在各種濃度的鹽脅迫條件下,根的生長(zhǎng)受鹽脅迫影響小,說(shuō)明了鹽脅迫下地上部分生長(zhǎng)變化大,而根在鹽脅迫下保持穩(wěn)定。根的肉質(zhì)化程度遠(yuǎn)低于地上部分,但是根在鹽處理下肉質(zhì)化程度也
4、增加。堿蓬用正常Hoagland培養(yǎng)液培養(yǎng)時(shí)有聚Na作用,根吸收的大部分Na運(yùn)往地上部分積累起來(lái),可以作為滲透調(diào)節(jié)劑,增強(qiáng)吸水能力。鹽脅迫下,ClNa主要積累在地上部分,大約有97%的Na積累在地上部分,根只占3%,因而地上部分細(xì)胞汁液滲透勢(shì)大大低于根。由于堿蓬的根鮮重占整株鮮重的110左右,而且鹽脅迫下無(wú)機(jī)鹽相對(duì)含量很低,所以堿蓬的地上部分是積累鹽的主要部位,根在抗鹽中的作用不在于積累無(wú)機(jī)鹽。在非鹽脅迫條件下堿蓬地上部分除了選擇K作為
5、滲透調(diào)節(jié)劑以外,Na也作為一種重要滲透調(diào)節(jié)劑,根傾向于選擇K十作為滲透調(diào)節(jié)劑。1.2液泡膜質(zhì)子泵活性與亞基表達(dá)堿蓬根和地上部分VHATPase的亞基有差異。從地上部分的VHATPase中檢測(cè)到66kDa55kDa36kDa和18kDa等4種亞基根只顯示1種亞基(18kDa),其余3個(gè)亞基與本實(shí)驗(yàn)所用抗體無(wú)明顯反應(yīng)??梢?,根和地上部分VHATPase的組成性構(gòu)成不同,存在異構(gòu)現(xiàn)象“soform),也有可能是有其他三種亞基雖然相同但是蛋白量
6、很少。200mmolLNaCl脅迫后,地上部分VHATPase各亞基的數(shù)目及種類沒(méi)有變化,表達(dá)量明顯增加,各亞基增加幅度相似。根內(nèi)VHATPase的18kDa亞基也明顯受鹽刺激而表達(dá)增加,與地上部分不同的是,根的印跡圖上出現(xiàn)一個(gè)新膚段(16kDa),可能是18kDa亞基的降解產(chǎn)物.NaCl脅迫后,地上部分VHATPase各亞基表達(dá)量明顯增加,其水解活性也相應(yīng)增加,由于沒(méi)有新亞基的出現(xiàn)而且鹽脅迫后亞基表達(dá)形式相同,所以VHATPase水解
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