肺靶向治療藥物載體Fe-,3-O-,4-磁微粒的安全性研究.pdf

1、目的：探討Fe3O4磁微粒對肺泡上皮細胞和血管內(nèi)皮細胞增殖和凋亡的影響以及靜脈注射Fe3O4磁微粒對小鼠肝、腎功能影響及對心、肺、肝、腎、脾組織的影響。 方法：實驗分體外實驗和體內(nèi)實驗兩大部分。 體外實驗：體外培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細胞株和肺泡上皮細胞，取指數(shù)生長期細胞用于實驗。實驗用Fe3O4磁微粒經(jīng)低溫間歇滅菌法處理后用RPMI1640培養(yǎng)基浸提得100％浸提液，實驗時以RPMI1640培養(yǎng)基稀釋至所需濃度。加入浸提液使其終

2、濃度分別為20％,、40％、60％、80％、100％，陰性對照為RPMI1640培養(yǎng)液。分別培養(yǎng)24、36、48小時。用MTT法、流式細胞儀等觀察細胞增殖指數(shù)和凋亡。 體內(nèi)試驗：取雄性昆明小鼠50只，隨機分為五組，各組小鼠經(jīng)尾靜脈一次性分別注入0.5ml生理鹽水和25％、50％、75％、100％Fe3O4磁微粒，于1、7、14、21天采集眼眶后靜脈叢血，檢測肝腎功能指標(AST、ALT、TP、ALB、BUN、CR)。滿30天處死

3、，取出肺、肝、腎、心、脾組織，做病理切片，觀察其組織變化；電鏡觀察其超微結構變化。 結果：(1)MTT結果顯示：與對照組相比，隨著Fe3O4磁微粒浸提液干預濃度和干預時間的逐漸增加，肺泡上皮細胞和血管內(nèi)皮細胞的增殖率無明顯變化，各組內(nèi)和各組間比較不存在統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 (2)流式細胞術(FCM)檢測凋亡結果顯示：與對照組相比，隨著Fe3O4磁微粒浸提液干預濃度的增高，肺泡上皮細胞和血管內(nèi)皮細胞的凋亡率無增高的

4、趨勢，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 (3)肝腎功能結果：隨著Fe3O4磁微粒浸提液干預濃度的增高和時間的延長，對照組與各試驗組肝腎功能指標無明顯差別；各組內(nèi)和各組間的比較，均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 (4)組織病理學結果：尾靜脈一次性注入0.5ml100％Fe3O4磁微粒30天后，肺泡上皮細胞、肝細胞中可見單個或成團暗黃色顆粒，為吞噬入胞漿的Fe3O4磁微粒。肺、肝、心、腎、脾組織細胞結構均正常。 (