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文檔簡(jiǎn)介
1、梨具有花粉直感現(xiàn)象,父本授粉會(huì)影響梨果實(shí)的相關(guān)性狀。本研究?jī)?yōu)化并建立了梨的適宜 SCoT分子標(biāo)記體系。通過(guò) SCoT標(biāo)記技術(shù),分析安徽省碭山縣的43份梨(Pyrus spp.)的遺傳多樣性和親緣關(guān)系。從43份梨材料中選取8個(gè)親緣關(guān)系不同的梨品種對(duì)碭山酥梨授粉,利用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR分析不同授粉品種對(duì)梨木質(zhì)素合成途徑中相關(guān)酶基因表達(dá)量的影響,探討異花授粉和親緣關(guān)系對(duì)碭山酥梨石細(xì)胞發(fā)育和木質(zhì)素代謝的影響,為篩選適宜的碭山酥梨授粉品種提供科
2、學(xué)理論依據(jù)。
主要研究結(jié)果如下:
1.采用單因素水平設(shè)計(jì)方法,優(yōu)化并建立了梨的適宜 SCoT分子標(biāo)記體系。優(yōu)化后梨 SCoT-PCR反應(yīng)體系為:模板 DNA30 mg/L,引物1.0μmol/L, dNTPs0.2mmol/L, Taq DNA聚合酶1.0U,10×Easy Taq Buffer(2 mmol/L,含 Mg2+)2.5μL,總體積為25μL。隨機(jī)選取2個(gè) DNA模板進(jìn)行引物篩選,最終從67條引物中篩選
3、出16條擴(kuò)增產(chǎn)物條帶清晰且有差異性的引物,共擴(kuò)增出145條帶,其中多態(tài)性條帶有126條,多態(tài)性比率為86.1%,每條引物平均擴(kuò)增出9.1條帶。
2. SCoT標(biāo)記的43個(gè)梨材料具有豐富的遺傳多樣性,遺傳相似性系數(shù)范圍在0.517~0.931之間,平均值為0.685。UPGMA法聚類分析表明,在遺傳相似系數(shù)為0.690的水平上,43份梨材料分為 A和 B兩組;在遺傳相似系數(shù)為0.746的水平上,A組又分為6個(gè)亞組。
3
4、.花后39天,8個(gè)品種授粉的碭山酥梨,石細(xì)胞團(tuán)個(gè)數(shù)在12.17~15.8個(gè)之間,碭山酥梨×鴨梨石細(xì)胞團(tuán)個(gè)數(shù)最多;石細(xì)胞團(tuán)面積范圍為22069.43μm2~46505.07μm2,碭山酥梨×紅金秋石細(xì)胞團(tuán)面積最大;石細(xì)胞含量范圍為4.438%~9.454%,碭山酥梨×鴨梨石細(xì)胞含量最高;木質(zhì)素含量范圍為0.017%~0.176%,碭山酥梨×若光的木質(zhì)素含量最高。
花后63天,8個(gè)品種對(duì)碭山酥梨授粉,石細(xì)胞團(tuán)個(gè)數(shù)在8.3~10.5
5、個(gè)之間,碭山酥梨×明月的石細(xì)胞團(tuán)個(gè)數(shù)最多;石細(xì)胞團(tuán)面積范圍為37596.86μm2~81260.19μm2,碭山酥梨×紅金秋的石細(xì)胞團(tuán)面積最大;石細(xì)胞含量范圍為9.298%~17.197%,碭山酥梨×紅金秋的石細(xì)胞含量最大;木質(zhì)素含量范圍為0.360%~0.640%,碭山酥梨×紅金秋的木質(zhì)素含量最大。
花后145天,8個(gè)品種授粉的碭山酥梨,石細(xì)胞團(tuán)個(gè)數(shù)在1~2.4個(gè)之間,碭山酥梨×黃花梨的石細(xì)胞團(tuán)個(gè)數(shù)最多;石細(xì)胞團(tuán)面積范圍為5
6、2085.73μm2~93752.80μm2,碭山酥梨×紅金秋的石細(xì)胞團(tuán)面積最大;石細(xì)胞含量范圍為0.327%~1.340%,碭山酥梨×鴨梨的石細(xì)胞含量最大;木質(zhì)素含量范圍為0.058%~0.448%,碭山酥梨×鴨梨的木質(zhì)素含量最大。
4.在花后39天、花后63天,8個(gè)與碭山酥梨親緣關(guān)系遠(yuǎn)近不同的品種,對(duì)碭山酥梨授粉,果實(shí)中7個(gè)木質(zhì)素合成相關(guān)酶基因的表達(dá)量都較高。在花后145天,8個(gè)品種授粉的碭山酥梨中 C4H、CAD的表達(dá)量
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