油茶品種遺傳多樣性及親緣關系的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、油茶是我國特有的木本食用油料樹種,本研究以油茶總DNA為材料,進行了SSRs、AFLPs和ISSRs分子標記的研究。
   采用正交試驗和單因素試驗,建立并優(yōu)化了油茶SSRPCR反應體系,并篩選出對適合油茶SSR分析的引物組合,結果表明,油茶最適SSRPCR反應體系為模板DNA(510ng/μL)1.0μL,Mg2+(25mmol/L)0.7μL,dNTP(10 mmol/L)0.15μL,正反向引物均為(10μmol/L)0.

2、2μL,TaqDNA聚合酶(5U/μL)0.1μL,10×PCRbuffer1.0μL,HPLCH2O6.65μL,總體積10.0μL;同時證明了微衛(wèi)星位點在山茶屬 (CamelliaL.)植物的種間通用性。
   AFLP反應體系包括酶切和連接體系、預擴增和選擇性擴增的建立與優(yōu)化,并篩選出8對(EACT/MAAC,EACG/MCAA,EAAG/MCGA,EAGT/MAGT,EAGG/MAAG,EAGG/MAGT,EATC/MA

3、GT,EAAT/MCAA)適合油茶AFLP分析的引物組合,且經重復驗證,條帶清晰,多態(tài)性高。
   利用ISSR分子標記技術對油茶品種遺傳多樣和親緣關系進行了研究,結果表明其遺傳多樣性較高,遺傳多樣性參數分別為多態(tài)性位點百分率(PPL)99.25%,期望雜合度(He)0.23,遺傳多樣性指數(I)0.37,普通油茶品種的遺傳多樣性參數為PPL為96.24%,He為0.23,I為0.37。用UPGMA 聚類分析法構建了樹形圖,表明

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