Angiopoietin-1對(duì)高糖培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞血管生成調(diào)控因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察高糖培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)血管生成調(diào)控因子促血管生成素-2(Ang-2)、色素上皮衍生因子(PEDF)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)變化,探討外源性給予促血管生成素-1(Ang-1)對(duì)這些血管生成調(diào)控因子的影響。
　　 方法:將HUVECs隨機(jī)分為正常組(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖組(30mmol/L葡萄糖)、甘露醇組(5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇)、Ang-1組(30

2、mmol/L葡萄糖+250ng/mlAng-1)。加入不同的處理因素,培養(yǎng)24h和48h后,采用細(xì)胞免疫組化、細(xì)胞免疫熒光和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-timePCR)方法,檢測(cè)Ang-2、PEDF和VEGF蛋白及mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:(1)Ang-2主要表達(dá)于HUVECs的胞漿和(或)胞膜。正常組和甘露醇組Ang-2蛋白和mRNA表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);高糖組和Ang-1組Ang-2蛋白和mRNA表

3、達(dá)較正常組隨時(shí)間上調(diào),僅高糖組48h上調(diào)明顯(P＜0.05);48hAng-1組Ang-2蛋白和mRNA表達(dá)低于同時(shí)點(diǎn)高糖組(P＜0.05)。
　　 (2)PEDF主要表達(dá)于HUVECs的胞漿和(或)胞膜。正常組和甘露醇組PEDF蛋白和mRNA表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);高糖組和Ang-1組PEDF蛋白和mRNA表達(dá)低于正常組(P＜0.05),并隨時(shí)間有下調(diào)趨勢(shì),高糖組48h下調(diào)明顯(與同組24h比較,P＜0.05);An

4、g-1組PEDF蛋白和mRNA表達(dá)較同時(shí)點(diǎn)高糖組上調(diào),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 (3)VEGF主要表達(dá)于HUVECs的胞漿和(或)胞膜。正常組和甘露醇組VEGF蛋白和mRNA表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);高糖組和Ang-1組VEGF蛋白和mRNA表達(dá)高于正常組(P＜0.05),并隨時(shí)間有上調(diào)趨勢(shì),高糖組48h上調(diào)明顯(與同組24h比較,P＜0.05);Ang-1組VEGF蛋白和mRNA表達(dá)較同時(shí)點(diǎn)高糖組下調(diào),但