微紫青霉菌GXCR的P-type ATPase基因克隆與表達(dá)分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文運(yùn)用3'RACE，PCR及電子克隆的方法克隆得到微紫青霉菌(Penicilliumjanthinillum)菌株GXCR銅轉(zhuǎn)運(yùn)P-type ATPase基因cDNA。ORF大小為3720bp，編碼一個(gè)1240氨基酸的蛋白質(zhì)，預(yù)計(jì)分子量為132KD。Blastn發(fā)現(xiàn)與棒曲霉(Aspergillus clavatus)菌株NRRL 1 copper-transportingATPase同源性最高(93％)。SMART分析表明，菌株GXC

2、R的銅轉(zhuǎn)運(yùn)P-type ATPase基因編碼產(chǎn)物存在7個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)，含P-type ATPase共有的保守功能域，以及P<,1B>型P-type ATPase的特征保守基序HP，CPX，推測GXCR銅轉(zhuǎn)運(yùn)P-type ATPase屬于P<,lB>型P-type ATPase。熒光定量PCR及Northem雜交分析發(fā)現(xiàn)40mM Cu<'2+>明顯的誘導(dǎo)了GXCR的銅轉(zhuǎn)運(yùn)P-type ATPase基因的表達(dá)，誘導(dǎo)30min時(shí)表達(dá)量最高，1小時(shí)

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