木蝴蝶總黃酮提取純化及藥理活性的研究.pdf

1、目的：通過優(yōu)化木蝴蝶總黃酮的提取和純化條件，并進行含量測定；同時檢測木蝴蝶總黃酮的體外抗氧化、抗腫瘤作用及大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)指標(biāo)，為木蝴蝶總黃酮的進一步分離、活性部位或單體化合物的制備提供實驗依據(jù)。
　　方法：采用溶劑提取分離的方法，從木蝴蝶中提取純化總黃酮類化合物；UV法測定黃酮化合物清除羥自由基、超氧陰離子、DPPH自由基的能力；MTT法檢測OF-60對MCF-7增殖抑制作用；流式細(xì)胞術(shù)檢測OF-60對MCF-7細(xì)胞凋亡影響；

2、HPLC測定木蝴蝶黃酮含量及粗提取物OFC在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)。
　　結(jié)果：
　　1）木蝴蝶總黃酮的最佳提取工藝條件是：用70％（V/V）乙醇溶液、溫度70℃、木蝴蝶粗粉與固液比為（1:8）、水浴回流三次，每次2小時，其提取率為19.50%。木蝴蝶總黃酮粗提物分離純化最佳實驗條件為：用HPD100型大孔樹脂，洗脫溶液為60%（V/V）乙醇，洗脫速度為1.0BV/h，洗脫體積為5.0BV，洗脫率高達90%以上。
　　2）

3、木蝴蝶與不同濃度乙醇洗脫黃酮部位的體外抗氧化實驗的結(jié)果：①對于羥自由基的清除能力從大到小依次為：OF-60> OF-80> OFC>OF-40；②對于超氧陰離子自由基與DPPH的清除能力從大到小依次為：OF-60>OFC> OF-80> OF-40；并均隨濃度的增加其抗氧能力增強。
　　3）在0-1000μg/mL范圍內(nèi)，OF-60對 MCF-7細(xì)胞增殖抑制作用隨濃度的增加而增強，其中濃度為1000μg/mL的OF-60對MCF-

4、7細(xì)胞增殖抑制率達39.94%，與對照組比較呈顯著差異性（P＜0.01 vs正常組）。濃度為0μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL的木蝴蝶黃酮OF-60誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞的凋亡率分別為：3.89%、11.07%、21.32%和24.19%。
　　4）以槲皮素為檢測指標(biāo)，木蝴蝶黃酮粗提物在大鼠體內(nèi)藥物代謝過程：t1/2=2.62±0.26h，Cmax=372.93±61.72，V/F=0.41±0.26，