紅旱蓮黃酮的提取、純化及生物活性研究.pdf

1、紅旱蓮(Hypericum ascyron L)又名長柱金絲桃、湖南連翹，系藤黃科金絲桃屬植物黃海棠的全草，主要分布在我國東北地區(qū)及黃河、長江和珠江流域。紅旱蓮全草入藥，有平肝、止血、敗毒、消腫的作用。據(jù)研究報道，紅旱蓮中主要的活性成分為槲皮素、山奈酚、金絲桃苷等黃酮類和氧雜蒽酮類化合物，其提取物具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、組胺釋放抑制等作用。目前，紅旱蓮中黃酮類化合物的提取、分離純化以及提取物的相關生物活性等研究未見有系統(tǒng)的報道。

2、　　 本文對紅旱蓮中黃酮類化合物的提取、純化及相關生物活性做了系統(tǒng)的研究，旨在獲得這一藥用植物資源中黃酮類活性成分的提取、純化的最優(yōu)工藝參數(shù)，探討其相關生物活性，為綜合開發(fā)利用紅旱蓮提供科學的理論依據(jù)和技術支持。主要研究內(nèi)容及實驗結果如下:
　　 1.通過對溶劑回流、超聲輔助提取、微波輔助提取三種提取方法的初步比較，篩選出較優(yōu)的提取方法——微波輔助提取法。結合響應曲面優(yōu)化微波輔助提取相關參數(shù)，得出其最佳提取條件為:微波功率70

3、0W、微波時間4 min、乙醇體積分數(shù)56％、液固比42∶1，此條件下總黃酮得率為5.91％。
　　 2.通過靜態(tài)吸附、解吸研究，對X-5、S-8、D101、AB-8、NKA-9、NKA-Ⅱ六種大孔吸附樹脂進行篩選，得出NKA-9樹脂的吸附率為79.41％，解析率為98.35％，對紅旱蓮黃酮同時具有較好的吸附和解析能力，是性能良好的總黃酮吸附劑。對NKA-9樹脂分離純化紅旱蓮黃酮的工藝條件進行了優(yōu)化，靜態(tài)吸附條件為:最佳吸附時間

4、為6h，紅旱蓮黃酮樣液初始濃度為3.5 mg/mL，樣液pH6.0，吸附溫度35℃;解吸條件為:洗脫劑乙醇體積分數(shù)60％，解吸液料比10∶1(60％乙醇溶液∶大孔吸附樹脂，mL/g)。此條件下純化后總黃酮純度可由原來的13.78％提高到67.41％。
　　 3.通過高效液相色譜分析得出純化后的紅旱蓮總黃酮主要含有槲皮素、山奈酚、蘆丁、金絲桃苷、異槲皮素等黃酮類成分，總黃酮質(zhì)量分數(shù)為47.7％。
　　 4.采用DPPH和羥

5、基自由基清除能力、總還原能力、總抗氧化能力、β-胡蘿卜素漂白實驗以及抗DNA氧化損傷實驗，評價了紅旱蓮總黃酮的抗氧化能力。結果表明，純化后的紅旱蓮總黃酮具有良好的抗氧化能力，可作為一種新型的天然抗氧化劑。
　　 5.酪氨酸酶、黃嘌呤氧化酶、α-葡萄糖苷酶的抑制率測定、可逆性與抑制動力學的研究表明，紅旱蓮總黃酮是抑制作用較溫和的、可逆的競爭型酪氨酸酶抑制劑，其半抑制率IC50為46.99μg/mL，抑制常數(shù)Ki為34.07μg/m