泰山梧桐花多糖對雛雞的免疫增強作用研究.pdf

1、近年來，家禽養(yǎng)殖業(yè)飛速發(fā)展，但免疫抑制性疾病卻流行嚴(yán)重，使疾病多發(fā)難控，導(dǎo)致對疫苗和抗生素的依賴加強，與此同時，疫苗的免疫效力減弱、抗生素濫用使得病原的耐藥性增強等種種弊端也逐漸暴露出來，多種新型綠色免疫增強劑和免疫佐劑應(yīng)運而生。植物多糖由于材料來源廣泛、價格低廉、功效明顯，并在解決藥物殘留和控制疫病方面有明顯優(yōu)勢，成為新型免疫增強劑的首選。多糖是一種大分子物質(zhì)，由多個單糖縮合失水而成，結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜、種屬特異性強。多糖己被證實具有抗氧化

2、、抗腫瘤、抗粘附、降低血糖等醫(yī)藥功效，但其最引人矚目的還是其免疫調(diào)節(jié)的作用，這也是近年來關(guān)于多糖研究的熱點。到目前為止，許多植物多糖已被證明具有免疫增強作用。
　　 梧桐花，為馬鞭草科植物臭梧桐的花，據(jù)《本草綱目拾遺》記載梧桐花有祛風(fēng)、降壓、止痢等功效，具有較高的藥用價值。目前我國梧桐花的種植逐漸形成規(guī)模，梧桐花的藥用價值受到廣泛關(guān)注，并取得了豐富的研究成果，但是國內(nèi)對于梧桐花的研究僅限于對其成分的提取、分析和人類保健品的研究與

3、開發(fā)，而對梧桐花多糖應(yīng)用于畜禽疫病防治方面的研究則鮮有報道。本研究室所在的泰山地區(qū)得天獨厚的自然環(huán)境和地理特征為梧桐樹的規(guī)模種植提供了便利，因此，本課題組以泰山梧桐花為研究對象，所用原料均是課題組成員在初春時采自泰山地區(qū)的新鮮梧桐花，風(fēng)干破碎后用水提醇沉法提取了粗多糖，同時經(jīng)過抽提脂肪、去除蛋白質(zhì)等步驟去除了多糖中的雜質(zhì)，保證了粗多糖較高的純度。試驗中選取由SPF胚孵化的健康雛雞為動物模型，探討梧桐花多糖對雛雞的免疫增強作用。旨在將其研

4、制成新型植物免疫增強劑，為健康畜牧業(yè)的發(fā)展做貢獻。
　　 本研究共分為以下二個部分:
　　 第一部分泰山梧桐花多糖對雛雞脾臟淋巴細胞增殖的影響研究
　　 為探究泰山梧桐花多糖(TFSFPS)對雛雞脾臟淋巴細胞體內(nèi)外增殖的影響，本研究分兩部分進行試驗:第一部分，分別向兩組雛雞注射3種濃度(400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL)的TFSFPS，同時設(shè)置泰山松花粉對照組（TPPPS，濃度為400μg/m

5、L）和空白對照組，在第7d、14d、21d時制備脾淋巴細胞，用PI染色法測定雛雞脾臟淋巴細胞轉(zhuǎn)化率;第二部分，將三種濃度的TFSFPS分別加入到體外分離培養(yǎng)的雞脾臟淋巴細胞中，同樣設(shè)置TPPPS對照組，培養(yǎng)48h后，用PI染色法測定雞脾臟淋巴細胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)果表明，在脾淋巴細胞體內(nèi)增殖試驗中，三種濃度TFSFPS作用下的脾臟淋巴細胞轉(zhuǎn)化率均顯著高于空白對照組，但小于TPPPS對照組對脾臟淋巴細胞增殖的刺激作用;在脾淋巴細胞體外增殖試驗中，

6、兩種多糖組的脾臟淋巴細胞轉(zhuǎn)化率同樣顯著高于對照組，TPPPS組的脾臟淋巴細胞轉(zhuǎn)化率均高于同濃度的TFSFPS組。由此表明，TFSFPS對雞脾臟淋巴細胞的體內(nèi)、外增殖均有刺激作用，但是刺激作用弱于TPPPS。本試驗結(jié)果對于TFSFPS開發(fā)成新型免疫增強劑提供了理論依據(jù)。
　　 第二部分泰山梧桐花多糖對雛雞免疫增強作用的研究
　　 為研究泰山梧桐花多糖對雛雞免疫增強作用及其對免疫抑制雛雞的免疫調(diào)理作用，本課題組選取由1日齡S

7、PF胚孵化的健康雛雞225只，隨機分為9個組:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組為TFSFPS組，分別于頸部皮下注射TFSFPS400 mg/mL、200mg/mL、100 mg/mL;Ⅳ、V、Ⅵ組為TFSFPS+CTX組，各組在注射三種濃度的多糖的同時注射40 mg/kg CTX;Ⅶ組為CTX對照組，只注射40 mg/kg CTX，Ⅷ組為TPPPS對照組，注射400 mg/mLTPPPS，Ⅸ組為空白對照組，注射等量滅菌生理鹽水。所有雛雞免疫新城疫滅活苗，分