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1、免疫增強(qiáng)劑是一類能單獨(dú)與抗原同時(shí)使用,通過不同的作用方式來(lái)增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體非特異性和特異性免疫的物質(zhì),所以中草藥免疫增強(qiáng)劑在畜禽健康養(yǎng)殖過程中應(yīng)用非常廣闊。研究表明,中藥多糖為許多中藥成分中的一種,不僅有抗病毒的作用,而且能增加機(jī)體的免疫能力。本研究以兩種中藥多糖為研究對(duì)象,主要從抗病毒和抗菌兩個(gè)方面研究了它們?cè)鰪?qiáng)免疫的作用和機(jī)理,篩選出一組用于增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的中藥免疫增強(qiáng)劑及疫苗佐劑,旨在為多糖類免疫增強(qiáng)劑的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。
2、 采用水煎醇沉法提取法從黃芪和淫羊藿中提取APS和EPS,得到APS、EPS的提取率(%)分別為34.4和57.9,用硫酸蒽酮法測(cè)定中藥多糖的含量,測(cè)得APS、EPS糖含量(%)分別為58.9和62.3。
將80羽1日齡的蛋公雞隨機(jī)分八組,每組均進(jìn)行新城疫疫苗免疫,再分別注射APS、EPS、APS-EPS、生理鹽水;將80羽1日齡的蛋公雞隨機(jī)分四組,均進(jìn)行法氏囊疫苗免疫,分別注射APS、EPS、APS-EPS、生理鹽水。通過
3、血凝抑制試驗(yàn)和間接ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)新城疫疫苗免疫的雞的血清中的抗體水平;用瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)定性確定法氏囊抗體,用間接 ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)法氏囊疫苗免疫的雞的血清抗體水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各中藥組均能明顯或顯著提高疫苗的免疫應(yīng)答能力,提高血清新城疫和法氏囊抗體水平從而提高疫苗免疫保護(hù)率。注射APS-EPS的實(shí)驗(yàn)組的免疫效果最為明顯。
APS和EPS對(duì)大腸桿菌免疫增強(qiáng)的作用試驗(yàn)方法:取80只約為13g-20.5g的小鼠,平均分8組,每組
4、10只,分別為空白對(duì)照組:生理鹽水+生理鹽水,Ⅰ組:方一+生理鹽水,Ⅱ組:方二+生理鹽水,Ⅲ組:方三+生理鹽水,Ⅳ組:方一+菌液,Ⅴ組:方二+菌液,Ⅵ組:方三+菌液,Ⅶ組:生理鹽水+菌液。
APS和EPS對(duì)金黃色葡萄球菌免疫增強(qiáng)的作用與以上試驗(yàn)方法一樣。通過使用IgG試劑盒測(cè)定血清中 IgG的濃度,計(jì)算小鼠脾臟指數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:黃芪-淫羊藿多糖組小鼠脾臟指數(shù)為0.58,空白對(duì)照組為0.52;金黃色葡萄球菌的黃芪-淫羊藿多糖組得出
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