霍山石斛體內(nèi)外抗Lewis肺癌作用研究.pdf

1、由于環(huán)境污染問題日益嚴峻、人們的營養(yǎng)失衡以及生活壓力增大等因素，癌癥已成為21世紀以來影響和威脅人類健康的第二大常見疾病，其中肺癌的發(fā)病率及死亡率最高，且其發(fā)病率仍具有增加趨勢。中藥是中華民族五千年燦爛文化的瑰寶，具有非常重要的地位。目前，運用中藥和一些天然小分子物質(zhì)來治療癌癥已經(jīng)越來越受到醫(yī)學界的青睞，從中藥中尋找抗腫瘤部位及有效單體化合物已成為開發(fā)抗癌新藥的途徑之一?；羯绞?Dendrobium huoshanense C.Z.T

2、ang et S.J.Cheng，俗稱米斛)作為中國歷代本草記載中的特有名貴中草藥，具有悠久的食用及藥用歷史，因此，探索霍山石斛中主要藥效成分的潛在抗腫瘤功效具有重要意義。
　　目的:研究人工栽培霍山石斛體內(nèi)外抗Lewis肺癌作用，確定人工栽培霍山石斛抗腫瘤有效部位、有效成分，探討霍山石斛抗腫瘤機制，旨在為臨床肺癌的治療尋找新的高效、低毒的藥物。
　　方法:1.霍山石斛各提取部位對Lewis肺癌細胞體外作用研究，包括(1)M

3、TT法檢測霍山石斛抑制Lewis肺癌細胞增殖的作用;(2)流式細胞術檢測霍山石斛各提取部位對Lewis肺癌細胞的細胞凋亡、細胞周期變化的影響;2.霍山石斛各提取部位對Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用研究，包括(1)小鼠Lewis肺癌移植瘤模型的建立;(2)病理形態(tài)學觀察各組小鼠生存狀態(tài)，記錄小鼠生理指標;(3)ELISA法檢測Lewis肺癌小鼠血清中腫瘤相關免疫細胞因子的分泌;(4)小鼠脾臟淋巴細胞增殖實驗，流式細胞術檢測霍山石斛各提取

4、部位對小鼠脾臟細胞中免疫細胞變化的影響。
　　結果:1.霍山石斛楓斗經(jīng)醇提、水提醇沉、酶解后分別獲得醇提物、醇提后水提物及精制多糖，其提取率分別為20.44％、35.31％、18.45％。2.體外抗腫瘤實驗表明霍山石斛莖有效部位對Lewis肺癌細胞均有抑制作用，醇提物在給藥初期效果好，對Lewis肺癌細胞具有明顯抑制;給藥48h時各組抑制效果最明顯，其中霍山石斛精制糖組抑制效果最佳，呈濃度依賴性顯著升高;霍山石斛精制多糖組在給藥4

5、8h后，與對照組相比凋亡細胞數(shù)目明顯增多，大部分細胞周期被阻斷，體外增殖受到抑制。3.抗腫瘤體內(nèi)篩選實驗表明，霍山石斛莖各有效部位均具有抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠腫瘤生長的作用，其中精制多糖組抑制作用最佳，灌胃高中低三種劑量，其抑瘤率分別為（64.52±3.54）％、（50.47±7.13）％、（37.68±5.17）％，與模型組比較存在顯著差異(p＜0.05或p＜0.01);小鼠胸腺和脾臟的臟器指數(shù)的變化表明荷瘤小鼠機體免疫器官狀況在