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文檔簡介
1、腦能量代謝信息的觀測在腦疾病病理和腦功能機(jī)理的揭示上發(fā)揮著重要的作用。低溫光學(xué)顯微成像技術(shù)利用低溫的優(yōu)勢可同時(shí)獲取樣本的結(jié)構(gòu)和代謝信息,并且沒有成像深度的限制,能獲取大尺寸樣本的三維分布信息,是腦能量代謝信息的一種重要觀測手段。然而,低溫光學(xué)顯微成像技術(shù)能否準(zhǔn)確表征組織、器官能量代謝狀態(tài),主要取決于能量代謝的低溫固定方法?,F(xiàn)有的有效低溫固定方法是基于大鼠模型建立的,對于應(yīng)用更為廣泛的模型動(dòng)物小鼠,尚未有適用的固定方法。這主要受限于小鼠生
2、理狀態(tài)難以控制、易受溫度影響,且耐操作性差。針對這一問題,本文建立了一種適用于小鼠腦能量代謝狀態(tài)的低溫固定方法,并展示了這一固定方法在鼠腦氧供應(yīng)調(diào)控和皮層擴(kuò)散性抑制中的初步應(yīng)用。
本文在分析已有的生物組織低溫固定技術(shù)的基礎(chǔ)上,選擇了適用于大鼠的改良漸進(jìn)式固定方法。根據(jù)小鼠腦的生理特征,分析了對鼠腦代謝狀態(tài)產(chǎn)生影響的多個(gè)因素,并進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化對比研究,建立了一種適合于小鼠腦代謝狀態(tài)低溫固定的方法。
在此基礎(chǔ)上,通
3、過鼠腦氧供應(yīng)調(diào)控實(shí)驗(yàn)與皮層擴(kuò)散性抑制(Cortical spreading depression,CSD)實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步驗(yàn)證了本文建立的小鼠腦固定方法的有效性及應(yīng)用價(jià)值。展示了缺氧、常氧和高氧三種氧濃度供應(yīng)時(shí)的鼠腦全腦代謝狀態(tài),證明了本文提出的固定方法的有效性。該結(jié)果不僅驗(yàn)證了能量代謝與氧供應(yīng)的相關(guān)性,還發(fā)現(xiàn)胼胝體區(qū)域和海馬區(qū)域的代謝狀態(tài)在缺氧和高氧條件下不一致的響應(yīng)模式。此外,本文還展示了CSD狀態(tài)下小鼠全腦代謝狀態(tài),發(fā)現(xiàn)CSD響應(yīng)區(qū)域
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