異常能量代謝狀態(tài)下小鼠肝臟microRNA的差異表達(dá).pdf

1、背景/目的： MicroRNA(miRNA)是一類(lèi)新近發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性非編碼小RNA分子，在器官發(fā)育與分化、細(xì)胞增殖與凋亡、腫瘤形成、免疫反應(yīng)等病理生理過(guò)程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。已有的研究表明，miRNA也參與了機(jī)體能量代謝平衡的調(diào)節(jié)，但miRNA與肝臟能量代謝相關(guān)的研究還很少。盡管“二次打擊”學(xué)說(shuō)等病理生理學(xué)機(jī)制可以部分解釋非酒精性肝臟脂肪變性和脂肪性肝炎中肝臟損害逐漸進(jìn)展的過(guò)程，但非酒精性脂肪性肝病發(fā)病和進(jìn)展的很多具體機(jī)制尚不清

2、楚。為了探索miRNA在非酒精性脂肪性肝病等肝臟異常代謝狀態(tài)下的調(diào)控作用，本研究對(duì)非酒精性脂肪性肝病和1型糖尿病模型小鼠肝臟的miRNA表達(dá)譜進(jìn)行了分析研究。 方法： 采用miRNA芯片對(duì)10只非酒精性脂肪性肝病模型ob/ob小鼠，8只鏈脲霉素造模的1型糖尿病模型小鼠，以及8只正常對(duì)照C57BL/6小鼠的肝臟miRNA表達(dá)譜進(jìn)行檢測(cè)，并用微陣列顯著性分析和聚類(lèi)分析軟件對(duì)芯片結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。miRNA芯片結(jié)果采用實(shí)時(shí)定量

3、RT-PCR進(jìn)行驗(yàn)證。本研究中發(fā)現(xiàn)的差異表達(dá)miRNA應(yīng)用生物信息學(xué)miRNA靶基因預(yù)測(cè)算法軟件進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)分析。 結(jié)果： 與正常對(duì)照小鼠相比，ob/ob小鼠發(fā)生脂肪變的肝臟miRNA中8個(gè)miRNA(miR-34a,miR-31,miR-103,miR-107,miR-194,miR-335-5p,miR-221,miR-200a)發(fā)生了顯著上調(diào)，4個(gè)miRNA(miR-29c，miR-451，miR-21，miR-

4、122)發(fā)生了顯著下調(diào)；鏈脲霉素造模的1型糖尿病小鼠肝臟miRNA中，miR-34a發(fā)生了顯著上調(diào)，m1R-122發(fā)生了顯著下調(diào)。比較ob/ob小鼠和鏈脲霉素造模的糖尿病小鼠肝臟miRNA表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)ob/ob小鼠肝組織中4個(gè)miRNA(miR-103，miR-31，m1R-107，m1R-126-3p)顯著上調(diào)，2個(gè)miRNA(miR-100，miR-29c)顯著下調(diào)。Ob/ob小鼠肝組織具有獨(dú)特的miRNA表達(dá)譜形式，聚類(lèi)分析可以將

5、ob/ob小鼠肝臟樣本與正常對(duì)照小鼠以及鏈脲霉素造模糖尿病小鼠的肝臟樣本明確地區(qū)分開(kāi)來(lái)。對(duì)本研究中發(fā)現(xiàn)差異表達(dá)miRNA的靶基因進(jìn)行生物信息學(xué)預(yù)測(cè)，獲得了一系列與非酒精性脂肪肝以及肝臟能量代謝相關(guān)的可能靶基因。 結(jié)論： 本研究發(fā)現(xiàn)了一系列在非酒精性脂肪性肝病和1型糖尿病這兩種肝臟異常能量代謝狀態(tài)疾病模型中發(fā)生差異表達(dá)的miRNA，提示miRNA在肝臟能量代謝過(guò)程中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用，并可能參與了非酒精性脂肪性肝病的病理