異常能量代謝狀態(tài)下小鼠肝臟microRNA的差異表達.pdf

1、背景/目的： MicroRNA(miRNA)是一類新近發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性非編碼小RNA分子，在器官發(fā)育與分化、細胞增殖與凋亡、腫瘤形成、免疫反應等病理生理過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。已有的研究表明，miRNA也參與了機體能量代謝平衡的調(diào)節(jié)，但miRNA與肝臟能量代謝相關(guān)的研究還很少。盡管“二次打擊”學說等病理生理學機制可以部分解釋非酒精性肝臟脂肪變性和脂肪性肝炎中肝臟損害逐漸進展的過程，但非酒精性脂肪性肝病發(fā)病和進展的很多具體機制尚不清

2、楚。為了探索miRNA在非酒精性脂肪性肝病等肝臟異常代謝狀態(tài)下的調(diào)控作用，本研究對非酒精性脂肪性肝病和1型糖尿病模型小鼠肝臟的miRNA表達譜進行了分析研究。 方法： 采用miRNA芯片對10只非酒精性脂肪性肝病模型ob/ob小鼠，8只鏈脲霉素造模的1型糖尿病模型小鼠，以及8只正常對照C57BL/6小鼠的肝臟miRNA表達譜進行檢測，并用微陣列顯著性分析和聚類分析軟件對芯片結(jié)果進行統(tǒng)計分析。miRNA芯片結(jié)果采用實時定量

3、RT-PCR進行驗證。本研究中發(fā)現(xiàn)的差異表達miRNA應用生物信息學miRNA靶基因預測算法軟件進行靶基因預測分析。 結(jié)果： 與正常對照小鼠相比，ob/ob小鼠發(fā)生脂肪變的肝臟miRNA中8個miRNA(miR-34a,miR-31,miR-103,miR-107,miR-194,miR-335-5p,miR-221,miR-200a)發(fā)生了顯著上調(diào)，4個miRNA(miR-29c，miR-451，miR-21，miR-

4、122)發(fā)生了顯著下調(diào)；鏈脲霉素造模的1型糖尿病小鼠肝臟miRNA中，miR-34a發(fā)生了顯著上調(diào)，m1R-122發(fā)生了顯著下調(diào)。比較ob/ob小鼠和鏈脲霉素造模的糖尿病小鼠肝臟miRNA表達譜，發(fā)現(xiàn)ob/ob小鼠肝組織中4個miRNA(miR-103，miR-31，m1R-107，m1R-126-3p)顯著上調(diào)，2個miRNA(miR-100，miR-29c)顯著下調(diào)。Ob/ob小鼠肝組織具有獨特的miRNA表達譜形式，聚類分析可以將

5、ob/ob小鼠肝臟樣本與正常對照小鼠以及鏈脲霉素造模糖尿病小鼠的肝臟樣本明確地區(qū)分開來。對本研究中發(fā)現(xiàn)差異表達miRNA的靶基因進行生物信息學預測，獲得了一系列與非酒精性脂肪肝以及肝臟能量代謝相關(guān)的可能靶基因。 結(jié)論： 本研究發(fā)現(xiàn)了一系列在非酒精性脂肪性肝病和1型糖尿病這兩種肝臟異常能量代謝狀態(tài)疾病模型中發(fā)生差異表達的miRNA，提示miRNA在肝臟能量代謝過程中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用，并可能參與了非酒精性脂肪性肝病的病理