非小細(xì)胞肺癌ERCC1、RRM1和TUBB3表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景:肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，由于其發(fā)病率和死亡率較高，成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。在所有確診的肺癌患者中非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)的發(fā)病率最高，占80％-85％左右。由于早期肺癌多缺乏臨床癥狀，不易被發(fā)現(xiàn)，因此多數(shù)患者就診時(shí)已處于中、晚期，失去手術(shù)機(jī)會(huì)，同時(shí)由于肺癌惡性程度高，易發(fā)生復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，所以術(shù)后輔助化療是治療晚期非小細(xì)胞肺癌的主要手段。在臨床工作中發(fā)現(xiàn)不同個(gè)體對(duì)化療的敏感性

2、不同，即使采用相同的化療方案及劑量，也很難預(yù)測(cè)肺癌患者的化療效果。既往研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤異質(zhì)性是導(dǎo)致術(shù)后化療敏感性不同的主要原因。不同個(gè)體的腫瘤內(nèi)化療敏感相關(guān)基因的表達(dá)不同。因此，腫瘤組織中化療敏感相關(guān)基因的分析和檢測(cè)是預(yù)測(cè)術(shù)后化療的療效的重要指標(biāo)。因此依據(jù)耐藥基因表達(dá)情況及藥敏實(shí)驗(yàn)來(lái)合理有效的選擇化療藥物越來(lái)越被人們所重視。近年來(lái)，化療藥敏生物標(biāo)記在肺癌中的應(yīng)用得到廣泛的研究，最常見的化療敏感性基因有切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)，

3、核苷酸還原酶1（RRM1）、Ⅲ型β微管蛋白(TUBB3)、胸甘酸合成酶(TYMS)等。大部分學(xué)者認(rèn)為這些基因的mRNA表達(dá)水平和蛋白水平表達(dá)具有一致性。但是也有部分研究發(fā)現(xiàn)ERCC1 mRNA與蛋白表達(dá)不具有相關(guān)性。為進(jìn)一步求證，本課題采用實(shí)時(shí)熒光PCR法(real-timefluorescent polymerase chain reaction，RT-PCR)和免疫組織化學(xué)染色法對(duì)100例非小細(xì)胞肺癌病例進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)常見的化療敏感

4、性基因，即ERCC1、RRM1、TUBB3的mRNA表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平，探討三者的mRNA和蛋白表達(dá)水平是否一致，分析三者與非小細(xì)胞肺癌臨床病理特征的關(guān)系。
　　目的:檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌中ERCC1、RRM1和TUBB3的mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)水平，分析三者的mRNA和蛋白表達(dá)水平是否一致。探討其蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌臨床病理特征的關(guān)系，為臨床合理應(yīng)用化療藥物提供依據(jù)。
　　方法:收集在河北省胸科醫(yī)院2010年1月至201

5、2年9月間行手術(shù)治療的100例原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌患者的臨床病理資料。采用RT-PCR法和免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)各樣本ERCC1、RRM1、TUBB3的mRNA表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平，并選取40例癌旁組織作為對(duì)照。各樣本參數(shù)間比較采用四格表x2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法(Fisher's Exact Test)，關(guān)聯(lián)性檢驗(yàn)采用Spearman秩和相關(guān)系數(shù)表示。統(tǒng)計(jì)軟件采用SPSS17.0軟件包。
　　結(jié)果:
　　1、在NSC

6、LC中ERCC1、RRM1、TUBB3 mRNA表達(dá)情況
　　RT-PCR檢測(cè)結(jié)果NSCLC中ERCC1 mRNA陽(yáng)性表達(dá)為34例(34％)，低/未表達(dá)為66例(66％);RRM1蛋白mRNA陽(yáng)性表達(dá)為為52例(52％)，低/未表達(dá)為48例(48％);TUBB3 mRNA陽(yáng)性表達(dá)為33例(33％)，低/未表達(dá)為67例(67％)。
　　2、在NSCLC中ERCC1、RRM1、TUBB3蛋白表達(dá)情況
　　免疫組織化學(xué)染色結(jié)

7、果在NSCLC組織中ERCC1、RRM1和TUBB3蛋白高表達(dá)分別為43例(43％)、38例(38％)和31例(31％)，40例癌旁組織中高表達(dá)分別為4例(10.0％)，3例(7.5％)和2例(5.0％)，NSCLC組織中ERCC1、RRM1和TUBB3蛋白高表達(dá)率高于其在癌旁肺組織中的表達(dá)，卡方檢驗(yàn)結(jié)果表明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05）。
　　3、ERCC1、RRM1、TUBB3 mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)具有一致性
　　

8、非小細(xì)胞肺癌腫瘤組織中ERCC1、RRM1、TUBB3 mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)一致率分別為77％(77/100)、70％(70/100)和76％(76/100)。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織中ERCC1、RRM1、TUBB3的mRNA和蛋白表達(dá)水平有良好的相關(guān)性(分別為r=0.528，P=0.000;r=0.422，P=0.000; r=0.449，P=0.000)。
　　4、ERCC1、RRM1和TUBB3與NSCLC臨床病理特征的

9、相關(guān)性
　　ERCC1、RRM1、TUBB3蛋白表達(dá)與性別、年齡、病理類型、分化程度、臨床分期(TNM)均無(wú)相關(guān)性(P＞0.05）。
　　5、ERCC1和RRM1蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析
　　ERCC1和RRM1同時(shí)高表達(dá)有27例;ERCC1高表達(dá)伴RRM1低表達(dá)的16例;RRM1高表達(dá)伴ERCC1低表達(dá)11例;二者同時(shí)低表達(dá)有46例。通過(guò)配對(duì)x2檢驗(yàn)和Spearman秩相關(guān)系數(shù)分析得出ERCC1、RRM1蛋白在非小細(xì)胞肺

10、癌腫瘤組織中表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.357，P=0.001)。
　　6、ERCC1和TUBB3蛋白表達(dá)相關(guān)性分析
　　ERCC1和TUBB3同時(shí)高表達(dá)有27例;ERCC1高表達(dá)伴TUBB3低表達(dá)16例;TUBB3高表達(dá)伴ERCC1低表達(dá)4例;二者同時(shí)低表達(dá)有53例。通過(guò)配對(duì)x2檢驗(yàn)和Spearman秩相關(guān)系數(shù)分析得出ERCC1與TUBB3表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.597,P=0.000)。
　　結(jié)論:
　　1、ERC

11、C1、RRM1和TUBB3蛋白在NSCLC中的表達(dá)水平均高于癌旁組織，提示三者可能參與NSCLC的發(fā)生和發(fā)展的過(guò)程。
　　2、非小細(xì)胞肺癌腫瘤組織中ERCC1、RRM1和TUBB3蛋白表達(dá)水平及mRNA表達(dá)水平結(jié)果具有較好一致性。
　　3、ERCC1、RRM1、TUBB3在NSCLC表達(dá)與性別、年齡、病理類型、分化程度、臨床分期無(wú)相關(guān)關(guān)系。
　　4、非小細(xì)胞肺癌組織中，ERCC1與RRM1表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系。