TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、卵巢癌(ovarian cancer,OC)是婦科常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,在我國(guó)卵巢癌的發(fā)病率有上升趨勢(shì),居?jì)D科腫瘤的第二位[1],同時(shí)年齡趨于年輕化。卵巢癌發(fā)病較隱匿,大多數(shù)確診時(shí)已屬中晚期,五年生存率雖然逐漸升高,但是至今仍不到50％,可見(jiàn)卵巢癌是嚴(yán)重威脅女性健康的重大疾病之一。目前卵巢癌的治療有手術(shù)、化療及放療等方法,而化療在治療卵巢癌中占有重要的地位。導(dǎo)致化療失敗并引起患者腫瘤復(fù)發(fā)、進(jìn)展及死亡的主要原因是腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物產(chǎn)生的多藥

2、耐藥（multidrug resistance,MDR)。由多種基因、多因素和多步驟的復(fù)雜過(guò)程產(chǎn)生腫瘤耐藥,而P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是多藥耐藥基因MDR1編碼產(chǎn)物,產(chǎn)生多藥耐藥性的主要原因是P-gp高表達(dá),而P-gp耐藥機(jī)制是在臨床實(shí)踐中唯一得到證實(shí)的,解決此障礙,腫瘤化療效果將取得突破性進(jìn)展。治療卵巢癌標(biāo)準(zhǔn)的化療方案是紫杉類(lèi)聯(lián)合鉑類(lèi),部分患者對(duì)紫杉類(lèi)及鉑類(lèi)藥物不敏感,效果不佳,如果卵巢癌患者對(duì)紫杉類(lèi)、鉑類(lèi)

3、藥物敏感性好,有利于提高化療有效率和延長(zhǎng)患者生存期使之受益。因此探尋對(duì)鉑類(lèi)和紫杉類(lèi)化療敏感性的預(yù)測(cè)因子對(duì)指導(dǎo)臨床合理用藥非常重要。
　　TUBB3(class III beta-tubulin,β-微管蛋白III型)是細(xì)胞骨架的重要組成部分,在多種真核細(xì)胞和部分原核細(xì)胞中存在,能夠維持細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和參與細(xì)胞運(yùn)動(dòng),還在細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂、凋亡和信息傳導(dǎo)中起著重要作用,而紫杉類(lèi)藥物可特異性的與β微管蛋白 III結(jié)合可阻滯其解聚,阻止有絲

4、分裂的完成,從而引起細(xì)胞凋亡達(dá)到殺滅腫瘤的作用。有研究表明 TUBB3與紫杉類(lèi)等抗微管類(lèi)化療藥物的耐藥密切相關(guān),其高表達(dá)可以使紫杉類(lèi)藥物降低對(duì)微管蛋白的解聚,從而導(dǎo)致其耐藥。
　　核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(excision repair cross-complementing group1,ERCC1)具有識(shí)別DNA損傷和鏈間切割的功能,是核苷酸剪切修復(fù)過(guò)程中最關(guān)鍵的一個(gè)內(nèi)切酶,其過(guò)表達(dá)可使腫瘤細(xì)胞停滯在 G2/M期,能夠迅速

5、修復(fù)損傷的DNA,引起對(duì)鉑類(lèi)藥物耐藥。
　　P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是ATP依賴(lài)性跨膜蛋白,不僅可能量依賴(lài)性地將藥物泵出細(xì)胞外,還能阻止化療藥物進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)從而減少細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度;此外還可對(duì)細(xì)胞內(nèi)的藥物分布發(fā)生改變,把部分藥物都聚集在不能產(chǎn)生自身作用的細(xì)胞器中,使藥物達(dá)不到療效,從而導(dǎo)致耐藥。
　　目的:
　　通過(guò)檢測(cè)TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌組織及正常卵巢組織中的表達(dá),分析

6、三者分別與卵巢癌患者相關(guān)臨床病理因素之間的關(guān)系;探討TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌中表達(dá)的相關(guān)性,預(yù)測(cè)卵巢癌患者對(duì)藥物的敏感性及制定個(gè)體化治療方案提供依據(jù)。
　　方法:
　　收集手術(shù)切除并經(jīng)術(shù)后病理確診的卵巢癌組織50例和正常卵巢組織(雙附件無(wú)病理情況子宮肌瘤患者的手術(shù)切除卵巢為正常對(duì)照組)25例病理蠟塊,將篩選出的50例卵巢癌患者的完整病例資料進(jìn)行整理,術(shù)前均未接受化療、放療、生物免疫治療。用免疫組織化學(xué)法Env

7、ision兩步法檢測(cè)TUBB3、ERCC1、P-gp在卵巢癌組織中的表達(dá),分析其與患者年齡、組織學(xué)類(lèi)型、病理分級(jí)、臨床分期、腫瘤發(fā)生部位之間的關(guān)系;應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)資料采用c2檢驗(yàn),相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析,均以α=0.05作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　免疫組織化學(xué)結(jié)果
　　1.TUBB3和ERCC1、P-gp在卵巢癌組織和正常卵巢組織中均有表達(dá),T

8、UBB3陽(yáng)性表達(dá)定位于細(xì)胞漿,在卵巢癌組織表達(dá)陽(yáng)性率為52.0%(26/50),正常卵巢組織中的陽(yáng)性率表達(dá)為24.0%(6/25),顯著高于正常卵巢組織中表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(c2=7.038,P=0.008);ERCC1陽(yáng)性表達(dá)定位于細(xì)胞核,在卵巢癌組織中表達(dá)陽(yáng)性率為70.0%(35/50),正常卵巢組織中的陽(yáng)性率表達(dá)為32.0%(8/25),卵巢癌組顯著高于正常卵巢組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(c2=9.420,P=0.002);P-gp

9、定位于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜中,在卵巢癌組織表達(dá)陽(yáng)性率為85.0%(42/50),正常卵巢組織中的陽(yáng)性率表達(dá)為40.0%(10/25),卵巢癌組顯著高于正常卵巢組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(c2=15.176,P=0.000);
　　2.在蛋白質(zhì)水平上卵巢癌組織中TUBB3、ERCC1和P-gp的表達(dá)與病理分級(jí)及臨床分期有關(guān)(均P<0.05),其中腫瘤分期越晚三者的表達(dá)水平均越高,且在病理分級(jí)方面,亦是腫瘤分化程度越低表達(dá)水平越高,但三者與患者年

10、齡、組織學(xué)類(lèi)型、發(fā)生部位均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05);
　　3.在卵巢癌組織中TUBB3和ERCC1的表達(dá)有相關(guān)性,且二者呈正相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);TUBB3和P-gp在卵巢癌組織中的表達(dá)有相關(guān)性,且二者呈負(fù)相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);卵巢癌組織中ERCC1的陽(yáng)性表達(dá)率高于P-gp的表達(dá),二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),ERCC1表達(dá)與P-gp的表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論:
　

11、　TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌組織中有較高的陽(yáng)性表達(dá)率,在正常卵巢組織中低表達(dá),提示三者均可能參與了卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程,且三者在卵巢癌組織中的表達(dá)均與腫瘤病理分級(jí)及臨床分期有關(guān),病理分級(jí)越低、臨床分期越晚表達(dá)的陽(yáng)性率越高,提示三者與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展及腫瘤耐藥有關(guān);檢測(cè)TUBB3和ERCC1在卵巢癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān);TUBB3和P-gp在卵巢癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān);ERCC1和P-gp在卵巢癌組織中表達(dá)無(wú)相關(guān)性。由于