小型基因芯片作為輻射生物劑量計(jì)的探索.pdf

1、目的:開發(fā)針對輻射損傷人員的小型基因芯片，對X射線照射人外周血淋巴細(xì)胞后的基因表達(dá)進(jìn)行了分析和驗(yàn)證，為探究不同劑量輻射的分子作用機(jī)制和優(yōu)化生物劑量計(jì)提供了進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　方法:1.以50種輻射敏感基因作為基礎(chǔ)，研制了一種小型基因芯片。2.分別采用輻射劑量為0.1Gy、0.5Gy、2Gy的X射線照射人外周血淋巴細(xì)胞。3.照射后4小時(shí)及20小時(shí)，用自主研制的基因芯片檢測淋巴細(xì)胞基因表達(dá)譜的改變，芯片表達(dá)譜數(shù)據(jù)通過NimbleSc

2、an軟件分析，選擇差異表達(dá)≥1.5倍為輻射誘導(dǎo)反應(yīng)基因。4.利用GO方法分析篩選出的部分輻射反應(yīng)基因的生物學(xué)功能。
　　結(jié)果：1.利用基因芯片技術(shù)研究X射線照射人外周血淋巴細(xì)胞4h后，0.1Gy組基因XPC表達(dá)上調(diào)，SSBP2表達(dá)下調(diào)；0.5Gy組基因BBC、GADD45A、IER5、XPC表達(dá)上調(diào)， SSBP2、CCT5表達(dá)下調(diào)；2Gy組基因BBC、CDKN1A、GADD45A、IER5、TP53I3、XRCC5、XPC表達(dá)上調(diào)

3、，CCT5、SSBP2表達(dá)下調(diào)。照射20h后，0.5Gy組BAX、BBC3、TP53I3、XPC表達(dá)上調(diào)，CCT5、PCNA表達(dá)下調(diào)；2Gy組BBC3、CDKN1A、TP53I3、XRCC5、XPC上調(diào)，CCT5、PCNA表達(dá)下調(diào)。2.利用GO分析得出，低劑量輻射誘導(dǎo)產(chǎn)生的基因主要參與細(xì)胞間信號(hào)通路、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞/組織防御、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定等過程，而高劑量誘導(dǎo)產(chǎn)生的基因主要參與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期阻滯等過程。
　　結(jié)論：1.小