基于輻射誘發(fā)染色體和DNA損傷的生物劑量計可行性研究.pdf

1、目的：為解決輻射生物劑量學(xué)的難點問題，如劑量率效應(yīng)、快速劑量估算和低劑量估算等，比較不同劑量率<'60>Co-γ射線照射人外周血淋巴細胞誘發(fā)的雙著絲粒染色體畸變率，分別擬合劑量效應(yīng)曲線，準(zhǔn)確估算受不同劑量率照射病人的生物劑量；探討單細胞凝膠電泳(SCGE)用于輻射損傷快速劑量估算的可行性；篩選DDB2和IER5兩個輻射敏感基因并觀察受<'60>Co-γ射線照射后的表達變化，探求其作為新型分子輻射生物劑量計的可行性。 方法：(1)

2、分別采用低、中、高劑量率(0.35、1.94和4.4Gy min<'-1>)<'60>Co-γ射線照射人外周血，一步法培養(yǎng)52h收獲制片，計數(shù)雙(多)著絲粒+環(huán)數(shù)目，比較不同劑量率雙著絲粒染色體畸變差異，擬合劑量效應(yīng)曲線及數(shù)學(xué)方程；(2)用堿性單細胞凝膠電泳技術(shù)檢測2Gy <'60>Co-γ射線照射后不同時間點的小鼠外周血細胞DNA損傷及0～5Gy <'60>Co-γ射線照射人外周血細胞DNA損傷，并擬合劑量效應(yīng)曲線；(3)用North

3、ernblot技術(shù)檢測0～10Gy <'60>Co-γ射線照射后4h、12h、24h人淋巴母細胞AHH-1細胞中DDB2、IER5基因相對表達量。 結(jié)果： (1)0.35、1.94和4.4Gy min<'-1>三種劑量率<'60>Co-γ射線照射人外周血，相同劑量率不同劑量點誘發(fā)的雙著絲粒染色體畸變率隨照射劑量的增加而增加，分別擬合的劑量效應(yīng)方程符合線性平方模型，相同劑量點不同劑量率誘發(fā)的雙著絲粒染色體畸變率隨劑量率的下

4、降而下降，存在明顯的劑量率效應(yīng)，用低劑量率曲線估算的劑量明顯高于高劑量率曲線估算的劑量。 (2)小鼠受照后外周血細胞DNA損傷(以彗星尾距嗍表示)在照射后即刻最明顯TM為33.77，照射后2h TM值下降到7.74，照射后24 h與照射前相比無顯著性差異(p>0.05)。人離體外周血細胞照射后即刻尾矩TM值隨劑量增加而增加，照射組與未照射組之間有非常顯著的差異(p<0.01)，劑量效應(yīng)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系Y=0.3619+2.18

5、34D(r=0.9946)；人外周血細胞尾矩TM照射后6 h與未照射組相比已無顯著性差異(p>0.05)。 (3)DDB2基因的誘導(dǎo)表達在照后4h和12h在0.5～4Gy劑量范圍內(nèi)有良好的劑量依賴性；IER5基因mRNA表達水平分別在照后4h 0.5～10Gy范圍內(nèi)、照后12h 0.5～6Gy范圍內(nèi)、照后24h 0.5～4Gy劑量范圍內(nèi)存在明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。 結(jié)論：<'60>Co-γ射線誘發(fā)雙著絲粒染色體畸變存在劑量率