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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
利用完全弗氏佐劑(CFA)前列腺注射法建立慢性非細(xì)菌性前列腺炎(CNP)SD大鼠模型。探討腦鈉尿肽(BNP)及腦鈉尿肽受體(NPR-A)在慢性非細(xì)菌性前列腺炎(CNP)大鼠脊髓背角神經(jīng)節(jié)(DRG)中的表達(dá)情況,以及BNP、NPR-A與CNP引起的慢性病理性疼痛的關(guān)系。
方法:
1.飼養(yǎng)清潔型雄性SD大鼠40只,隨機(jī)分為4組分別為:對(duì)照組、CFA注射3d(造模3d)組、造模7d組、造模10
2、d組,每組10只,向前列腺內(nèi)注射CFA0.1ml構(gòu)建慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠模型。
2.提取各實(shí)驗(yàn)組大鼠脊髓背角L5-S2段神經(jīng)節(jié)及前列腺組織。
3.每只大鼠的前列腺組織分為兩部分,一部分行組織細(xì)菌培養(yǎng),培養(yǎng)陰性者入組,以排外細(xì)菌性前列腺炎可能,另一部分前列腺組織病理切片,常規(guī)HE染色,觀察不同實(shí)驗(yàn)組中前列腺組織的腺體、血管、間質(zhì)變化。以確定炎癥模型是否成功。
4.提取L5-S2神經(jīng)節(jié)組織RNA
3、,進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄成cDNA、再行實(shí)時(shí)熒光定量PCR,觀察BNP及NPR-A在對(duì)照組及造模后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)表達(dá)差異,探討B(tài)NP、NPR-A與非細(xì)菌性前列腺炎的相關(guān)性。
結(jié)果:
1.前列腺組織細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)結(jié)果均為陰性,CFA能誘導(dǎo)大鼠前列腺炎癥,可以產(chǎn)生穩(wěn)定可靠的大鼠CNP模型。HE染色發(fā)現(xiàn)隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng),炎癥程度越劇烈,并在7天時(shí)達(dá)到穩(wěn)定,產(chǎn)生與臨床病理相符合的病理類型。對(duì)照組無明顯炎癥表現(xiàn);
2.Re
4、al-Time PCR結(jié)果顯示BNP在造模3d、7d、10d組的表達(dá)量分別為對(duì)照組的2.16±0.35倍、1.61±0.21倍、1.32±0.36倍。其中造模3d及7d組與對(duì)照組差異有顯著性(P<0.05);
3.Real-Time PCR結(jié)果顯示NPR-A在造模3d、7d、10d組的表達(dá)量分別為對(duì)照組的2.75±0.06倍、2.15±0.15倍、1.04±0.13倍。其中造模3d及7d組與對(duì)照組差異有顯著性(P<0.05
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