MxIRT1信號(hào)肽和可變區(qū)的功能分析及水稻IRT突變體的篩選.pdf

1、本文首先將小金海棠MxIRT1去信號(hào)肽和可變區(qū)區(qū)域的IRT基因轉(zhuǎn)化不同二價(jià)金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體的酵母突變株,通過(guò)營(yíng)養(yǎng)缺陷篩選剛性轉(zhuǎn)化子。運(yùn)用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀對(duì)不同載體轉(zhuǎn)化的酵母細(xì)胞進(jìn)行了體內(nèi)各種離子含量的測(cè)定,結(jié)合酵母的異源互補(bǔ)法結(jié)果證實(shí)了MxIRT1能夠轉(zhuǎn)運(yùn)二價(jià)金屬陽(yáng)離子,但轉(zhuǎn)運(yùn)效率不同。MxIRT1對(duì)Zn、Fe的吸收有一定作用；通過(guò)對(duì)去信號(hào)肽和可變區(qū)的MxIRTI的研究表明,1)MxIRT1前端約105 bp的信號(hào)肽序列,它的缺失推

2、測(cè)會(huì)影響到蛋白的功能。2)存在于跨膜結(jié)構(gòu)域Ⅲ、Ⅳ之間的富含組氨酸的可變區(qū)對(duì)于Zn、Fe的轉(zhuǎn)運(yùn)有一定作用。它的缺失導(dǎo)致酵母對(duì)Zn的吸收量有明顯下降。對(duì)Fe的影響在吸收量和細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)上也比較明顯。同時(shí)通過(guò)非損傷微測(cè)系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)在水稻小苗中,轉(zhuǎn)IRT正義的水稻根毛在缺鐵時(shí)向外分泌H+,而野生型沒(méi)有此現(xiàn)象。這種情況在酵母中同樣發(fā)現(xiàn),并且去信號(hào)肽和完整MxIRT1的酵母也有此現(xiàn)象,但是去可變區(qū)的MxIRT1的酵母在缺鐵情況下與有鐵情況下并沒(méi)有區(qū)別,