擬南芥菌核病抗性增強突變體的篩選及CIPK23基因的功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、由Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary引起的菌核病是分布最廣、危害最嚴重的油料、蔬菜等作物病害之一，但是對該病的抗病和致病機制的研究均欠深入。擬南芥具有基因組小、結構簡單、形體小、生長周期短、繁殖系數高、自花授粉等優(yōu)點，且其基因組全序列測定工作已于2000年12月完成。為此，我們以模式植物擬南芥(Arabidopsisthaliana)為材料，摸索了抗菌核病突變體的篩選方法，篩選獲得了一批突變體，對ci

2、pk23失活突變體進行了克隆和功能驗證，取得了如下主要結果： 1.用草酸噴霧接種法、草酸平板篩選法、核盤菌噴霧接種法、核盤菌離體葉片接種法篩選擬南芥菌核病抗性增強突變體，結果表明用離體葉片接種法篩選是最好的。 2.用離體葉片法篩選了5萬株擬南芥激活標簽突變體。共篩選出菌核病抗性增強突變體50株；44株通過TAIL-PCR擴增獲得T-DNA插入側翼序列；34株測序比對獲得有效序列。其中5株突變體M150、M138、M12、

3、M833、Mc140的T-DNA為同一插入位點，均插在At1g30270(calcineurinB-likecalciumsensor(CBL)-interactingproteinkinase23)-Cipk23內部，故通稱為CIPK23突變體。 3.分析發(fā)現這一突變體對鹽更敏感，而且該性狀屬顯性突變，故推測為T-DNA插入引起上下游基因增強表達所致；RT-PCR驗證表明增強子下游基因Atlg30280表達量比野生型顯著提高，

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