AQP4、Cx43與酒精性腦病基礎(chǔ)上輕微腦外傷性死亡關(guān)系的研究.pdf

1、背景與目的：
　　本課題組既往研究發(fā)現(xiàn)，較之于急性灌酒大鼠，慢性灌酒大鼠受腦震蕩性打擊后死亡率明顯升高，但死亡機制尚不明確。本實驗通過研究酒精性腦病大鼠腦組織星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)及其水通道蛋白4（aquaporins-4, AQP4）、縫隙連接蛋白43（connexins-43, Cx43）表達(dá)的改變，探討酒精性腦病基礎(chǔ)上輕微腦外傷（mild traumatic brain injury, MTBI）導(dǎo)致死亡的機制。
　　實

2、驗方法：
　　雄性SD大鼠48只，體重300±50g，隨機分灌水（10只）、灌水打擊（10只）、灌酒（10只）及灌酒打擊組（18只）。灌酒及灌酒打擊組以食用白酒（北京紅星二鍋頭,52％v/v）灌胃4 w，每天9:00、15:00各1次，每次10 ml/kg。灌水及灌水打擊組以相同方式用自來水灌胃。最后一次灌胃2h后，灌水及灌酒組大鼠麻醉處死，灌水打擊及灌酒打擊組予以腦震蕩性打擊，存活大鼠歸為存活組（A組），觀察2 h后麻醉處死，死

3、亡大鼠歸于死亡組（B組）。大鼠死后均立即取腦組織，大體觀察后石蠟包埋制片， HE及免疫組化（immunohistochemistry, IHC）染色，測量IHC染色AQP4及Cx43累積光密度（integral optical density, IOD）值。另取延腦背側(cè)組織，透射電鏡觀察。
　　結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，采用方差分析、獨立樣本T檢驗等分析處理，P<0.05為差異有顯著性。
　　結(jié)果：
　　1

4、一般情況
　　灌酒大鼠呈精神萎靡、消瘦、皮膚潰爛、寄生蟲生長等表現(xiàn)。灌水、灌水打擊、灌酒及灌酒打擊組蛛網(wǎng)膜出血率依次為0、0、10%及75%，死亡率為0、0、0及44%。
　　2 HE染色
　　灌水組神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞正常。灌水打擊組可見固縮深染與腫脹淡染的神經(jīng)元。灌酒組多見毛刺狀腫脹及固縮深染的神經(jīng)元，膠質(zhì)細(xì)胞明顯腫脹。灌酒打擊組多見腫脹淡染及固縮深染神經(jīng)元；血管周隙明顯擴大。
　　3透射電鏡
　　灌水組血

5、管基膜完整，終足中間絲粗細(xì)均勻、平直致密。灌水打擊組終足與內(nèi)皮間隙增寬，中間絲疏松扭曲。灌酒及灌酒打擊組見暗細(xì)胞及噬神經(jīng)現(xiàn)象。灌酒組終足中間絲腫脹，灌酒打擊組終足大部分消失，殘存脹破線粒體。
　　4 IHC染色
　　額葉、側(cè)腦室旁及腦干區(qū)IOD值，AQP4：灌水打擊與灌水組無明顯差異(P>0.05)，灌酒較灌水組明顯升高(P<0.01)，灌酒打擊存活組、死亡組均明顯低于灌酒組(P<0.01)且死亡組明顯低于存活組(P<0.0

6、1)；Cx43：灌酒組較灌水組明顯降低(P<0.01)，灌酒打擊存活組與灌酒組無明顯差異(p>0.05)，灌酒打擊死亡組明顯低于灌酒組(P<0.01)。
　　室管膜 IOD值，AQP4、Cx43：灌酒較灌水組明顯升高(P<0.01)，灌酒打擊存活組與灌酒組無明顯差別(P>0.05)，死亡組明顯高于其它組(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1、慢性灌酒大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞及其終足形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變可能構(gòu)成酒精性腦病的病理基礎(chǔ)，