小麥V型細胞質(zhì)雄性不育分子機理的研究.pdf

1、細胞質(zhì)雄性不育是高等植物中普遍存在的一種母性遺傳現(xiàn)象，它既是雜交育種的重要手段，也是研究質(zhì)核互作的理想材料。目前普遍認為不育基因位于線粒體，但雄配子敗育的發(fā)生作為一個復(fù)雜的過程亦有眾多的核基因，核質(zhì)互作導(dǎo)致敗育的發(fā)生。本研究從核質(zhì)基因兩個方面對V型小麥細胞質(zhì)雄性不育發(fā)生的分子機理進行了探討，首先利用線粒體基因測序的方式尋找不育候選基因，其次用MSAP法研究了不同胞質(zhì)來源的不育系及保持系核基因甲基化水平差異。
　　(1)我們通過Lo

2、ng-PCR得到V型小麥細胞質(zhì)雄性不育系線粒體基因組的3個大于10kb的大片段，測序結(jié)果顯示，其堿基序列與K型不育系一致性高達98％，說明線粒體基因組在偏凸山羊草或易變山羊草和粘果山羊草間高度保守，對V型小麥33個線粒體基因及22個orfs(K型不育系中的不育候選基因)克隆測序的結(jié)果顯示，除rps13及orf256外，其余線粒體基因及orfs在兩個不育系間高度保守，由此推測二者可能具有相似的不育基因及不育機理。
　　(2)甲基化分

3、析結(jié)果顯示，相同核遺傳背景的不育系(KA\VA)無論是甲基化還是全甲基化水平均高于其保持系(B);就單個甲基化位點而言，不育系(KA/VA)相對于保持系發(fā)生甲基化和去甲基化兩種修飾，但以甲基化修飾為主，推測在雄配子敗育發(fā)生機制中有可能是通過甲基化的方式抑制了部分基因的表達，影響了減數(shù)分裂過程，與不育基因共同作用導(dǎo)致花粉敗育的發(fā)生。
　　(3)利用同源克隆獲得TSK1基因11條基因組序列及4條cDNA序列，發(fā)現(xiàn)小麥中存在多種SKP1