山核桃蒲殼總生物堿的提取純化及細(xì)胞毒性研究.pdf

1、本文以浙江臨安產(chǎn)山核桃(Carya cathayensis Sarg.)蒲殼為研究對象,旨在對其中藥用價(jià)值較高的生物堿成分進(jìn)行提取與純化工藝及細(xì)胞毒性的研究,為進(jìn)一步的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。本論文采用傳統(tǒng)浸提法、超聲輔助提取法、微波輔助提取法從山核桃蒲殼中提取生物堿成分,以總生物堿得率為指標(biāo),分別通過正交試驗(yàn)考察最佳工藝,并將三種提取方法的最佳工藝進(jìn)行了對比,結(jié)果表明微波輔助提取法的提取率高于傳統(tǒng)浸提法和超聲輔助提取法,最終確定提取條件

2、為:室溫浸泡24h,乙醇濃度60％,微波時(shí)間7min,微波功率520w,微波溫度為30℃,生物堿得率為0.94%。利用大孔樹脂對總生物堿進(jìn)行純化。通過靜態(tài)試驗(yàn)從三種樹脂(D101、NKA-9、AB-8)中篩選出適合純化山核桃蒲殼生物堿的樹脂種類,研究結(jié)果表明,NKA-9型樹脂綜合性能最好。論文進(jìn)一步通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了純化工藝參數(shù),包括上樣液pH、洗脫液濃度和洗脫液用量三個(gè)因素。以生物堿的純化倍數(shù)和固體得率為指標(biāo),通過極差分析

3、和方差分析,最終確定純化工藝為上樣液pH為7.0,乙醇濃度為50%,乙醇用量為3BV,在此工藝下生物堿純化倍數(shù)達(dá)3.173倍,固體得率為34.78%。本論文采用MTT細(xì)胞計(jì)數(shù)法對山核桃蒲殼總生物堿進(jìn)行細(xì)胞毒性研究。以細(xì)胞增殖抑制率為指標(biāo),探討了總生物堿對HepG-2、K562、Bcap-37的增殖抑制作用及形態(tài)的影響。結(jié)果表明:山核桃蒲殼總生物堿對HepG-2、K562、Bcap-37的增殖有明顯的抑制作用,對HepG-2細(xì)胞的抑制作用