龍葵中甾體類(lèi)生物堿的提取、純化及分析方法研究.pdf

1、本文研究了天然植物龍葵(Solanum nigrum L．,S.N.L．)中甾體類(lèi)生物堿(Steriodal Alkaloids)的提取、純化及測(cè)定方法。在此基礎(chǔ)上，就長(zhǎng)沙市岳麓山龍葵果實(shí)成長(zhǎng)期內(nèi)甾體類(lèi)生物堿的形成、變化趨勢(shì)進(jìn)行了探討。 1、確定了龍葵植物體內(nèi)甾體類(lèi)生物堿、澳洲茄胺的提取方法及其提取工藝參數(shù)。 經(jīng)比較加熱回流醇提法(酸性條件)、堿浸法、超聲波輔助醇提法三種提取工藝，得出：加熱回流醇提法提取甾體類(lèi)生物堿效率

2、最佳，龍葵莖葉中澳洲茄胺的平均得率為O.42％，果實(shí)中澳洲茄胺的平均得率3.22％；超聲波輔助醇提法提取龍葵甾體類(lèi)生物堿具有操作簡(jiǎn)單、提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)，但提取效率稍低；堿浸法提取率最低。 采用加熱回流醇提法提取龍葵生物堿的最佳實(shí)驗(yàn)條件為：水浴溫度為65℃、乙醇濃度為95％、水浴加熱時(shí)間2h。各因數(shù)對(duì)澳洲茄胺得率的影響大小分別為：回流時(shí)間>物重(固定液料比)>乙醇濃度=溫度。 澳洲茄胺的最佳水解條件為：采用40mL2mol

3、／L HCI：無(wú)水乙醇=1:1(v:v)的溶液溶解甾體類(lèi)生物堿，在100℃下水解2h。 2、經(jīng)結(jié)晶法初步純化甾體類(lèi)生物堿后、采用NKA-9大孔吸附樹(shù)脂動(dòng)態(tài)程序洗脫法對(duì)澳洲茄胺進(jìn)行純化處理，可得到很好的分離純化效果：澳洲茄胺在樹(shù)脂中的吸附率、總收率分別達(dá)到99％、98％以上，熔點(diǎn)為192-194℃。 程序洗脫的步驟為：將含澳洲茄胺的甲醇溶液定量取出并減壓蒸干后，殘留物用0.5mol／L的HCl溶解，移至分液漏斗，NaOH溶

4、液調(diào)節(jié)pH至10.5，將溶液移入裝有樹(shù)脂的層析柱，分別采用濃度為20％、40％、60％的甲醇lOOml溶液洗脫后，再用lOOml濃度為60％、pH分別為4.0、3.5、2.7的甲醇溶液洗脫，取濃度為60％、pH為2.7的甲醇溶液即得到澳洲茄胺的純化物。 3、建立了甾體類(lèi)生物堿、澳洲茄胺的定性、定量檢測(cè)方法。高效液相色譜測(cè)定甾體類(lèi)生物堿及其苷元澳洲茄胺的最佳實(shí)驗(yàn)條件為：以C18硅烷基鍵合相為固定相，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)210nm，流動(dòng)相選