鎢酸鈉對(duì)谷氨酸鈉誘導(dǎo)的代謝綜合征小鼠的改善作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:本研究就鎢酸鈉對(duì)谷氨酸鈉誘導(dǎo)的代謝綜合征（肥胖）小鼠的改善作用及機(jī)制進(jìn)行初步探究。
　　方法:
　　1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
　　本實(shí)驗(yàn)對(duì)新生ICR小鼠皮下注射4g/kg谷氨酸鈉(MSG)構(gòu)建肥胖模型，飼養(yǎng)至4月齡時(shí)將符合肥胖模型的小鼠按體重分為6組:正常組、模型對(duì)照組、低劑量組（鎢酸鈉，0.3mg/ml）、中劑量組（鎢酸鈉，0.7mg/ml）、高劑量組（鎢酸鈉，2mg/ml）及陽(yáng)性藥組（奧利司他120mg/kg）。鎢酸鈉溶

2、于飲水中，奧利司他灌胃給藥，小鼠自由采食飲水。詳細(xì)記錄各組小鼠體長(zhǎng)、腹圍、體重變化，監(jiān)測(cè)攝食、飲水量。期間，取新鮮糞便測(cè)定糞脂含量，處死動(dòng)物前測(cè)定Lee's指數(shù)變化。連續(xù)給藥6周后處死，斷頭取血，取血測(cè)定血清葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇含量。稱取全部腹部白色脂肪組織的重量，并取部分白色脂肪組織及肝組織用4％多聚甲醛固定做病理切片。白色脂肪組織的病理切片做H-E染色，肝組織病理切片做油紅O染色。肝臟勻漿后測(cè)定肝糖、肝脂含量，腹腔內(nèi)白色脂肪組

3、織用裂解液勻漿做Western Blot觀察脂聯(lián)素蛋白的表達(dá)情況。
　　2、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
　　將3T3-LI前脂肪細(xì)胞接種于6孔培養(yǎng)板中，用含10％胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)，待細(xì)胞融合48h后，加含0.5mmol/L異丁基一甲基一黃嘌呤、0.25nmol/L地塞米松和1mg/L胰島素的10％胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)48h，換以含1mg/L胰島素10％胎牛血清的高糖DMEM，此誘導(dǎo)分化過(guò)程中加入100、300、900μM鎢酸鈉

4、（并設(shè)對(duì)照組），再培養(yǎng)48h，用油紅O染色細(xì)胞，分析脂滴的形成度。另一批細(xì)胞也同樣處理，加入細(xì)胞裂解液抽提蛋白，做Western Blot觀察脂聯(lián)素蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1、鎢酸鈉對(duì)MSG小鼠體重、腹圍和Lee's指數(shù)的影響:鎢酸鈉能抑制MSG小鼠體重的增長(zhǎng)，呈劑量依賴性關(guān)系;中、高劑量鎢酸鈉能明顯減少模型小鼠的腹圍，并能有效降低肥胖小鼠Lee，s指數(shù)。
　　2、鎢酸鈉對(duì)MSG小鼠攝食、飲水量的影響:鎢酸鈉

5、不影響模型小鼠的攝食、飲水量。
　　3、鎢酸鈉對(duì)MSG小鼠腹部脂肪濕重、脂肪系數(shù)的影響:與模型組相比，鎢酸鈉能顯著降低肥胖小鼠腹部白色脂肪濕重，有劑量依賴性關(guān)系。
　　4、鎢酸鈉對(duì)MSG小鼠血清葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇的影響:與正常小鼠比，模型組的血糖值無(wú)明顯升高，但鎢酸鈉高劑量能顯著降低血糖濃度。中、高劑量鎢酸鈉均能明顯降低模型動(dòng)物的血清甘油三酯、總膽固醇水平。
　　5、鎢酸鈉對(duì)MSG小鼠糞便中甘油三酯、總膽固醇含

6、量的影響:中、高劑量鎢酸鈉組小鼠的糞便中甘油三酯的含量明顯增加。
　　6、鎢酸鈉對(duì)MSG小鼠肝臟葡萄糖(Glu)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHO)含量的影響:高劑量鎢酸鈉能顯著降低肝臟中葡萄糖含量;中、高劑量鎢酸鈉能顯著降低肝中甘油三酯含量;高劑量鎢酸鈉能顯著降低肝臟中總膽固醇含量。
　　7、鎢酸鈉對(duì)MSG小鼠白色脂肪組織（WAT）細(xì)胞大小的影響:中、高劑量鎢酸鈉能顯著減少WAT細(xì)胞的直徑。
　　8、鎢酸鈉對(duì)MSG

7、小鼠肝脂肪變的影響:中、高劑量鎢酸鈉能顯著改善模型小鼠的脂肪性肝病變。
　　9、鎢酸鈉對(duì)MSG小鼠WAT細(xì)胞的脂聯(lián)素蛋白表達(dá)影響:中、高劑量鎢酸鈉能顯著升高WAT的脂聯(lián)素水平。
　　10、鎢酸鈉對(duì)3T3-L1細(xì)胞誘導(dǎo)成脂肪細(xì)胞的影響:中、高劑量鎢酸鈉能顯著抑制3T3-L1細(xì)胞中的脂肪堆積。
　　11、鎢酸鈉對(duì)3T3-L1細(xì)胞誘導(dǎo)成脂肪細(xì)胞過(guò)程中脂聯(lián)素蛋白表達(dá)的影響:中、高劑量鎢酸鈉能顯著增加3T3-L1細(xì)胞中脂聯(lián)素的水

8、平。
　　結(jié)論:谷氨酸鈉誘導(dǎo)后的實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)明顯的肥胖體征，鎢酸鈉能減輕體重及Lee's指數(shù)，并減少腹型肥胖的程度;鎢酸鈉發(fā)揮減肥作用時(shí)并不會(huì)影響模型動(dòng)物的攝食量;高劑量的鎢酸鈉可降低血糖及肝糖水平;鎢酸鈉可改善MSG肥胖小鼠的血脂，減少腹部白色脂肪的細(xì)胞直徑，增加糞便中TG含量，其降TG作用可能是與抑制脂肪在腸道的吸收及促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化成儲(chǔ)脂能力更強(qiáng)的小脂肪細(xì)胞有關(guān);鎢酸鈉可降低肝臟中TG的堆積，緩解模型小鼠非酒精性脂肪性肝病的