茄子花青素生物合成關(guān)鍵基因的克隆與表達(dá)分析.pdf

1、Dissertation submitted for requirement of Master’s degree Cloning and Expression Characterization of the Athocyanin Biosynthesis Key Genes in Eggplant (Solanum melongena L.) Candidate: Li Xiang Major: Horticulture Superv

2、isor: Chen Huoying (Professor) School of Agriculture and Biology Shanghai Jiao Tong University Shanghai, China January, 2011 上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文 II SmDFR 推導(dǎo)的氨基酸序列具有典型的 NADPH 結(jié)合基序和底物結(jié)合基序，在決定酶活性的 145 位點(diǎn)，SmDFR 為天冬氨酸。SmDFR 在云南紫長茄和云

3、南圓白茄中的表達(dá)具有很大差異。 在云南紫長茄的所有紫色組織中，YLPSmDFR 的表達(dá)量要顯著大于云南圓白茄相同組織的 YRWSmDFR。通過 southern 雜交，SmDFR 在云南紫長茄和云南圓白茄中均為單拷貝。將 YLPSmDFR 和 YRWSmDFR 分別進(jìn)行原核表達(dá)， 檢測(cè)融合蛋白對(duì)二氫山奈酚， 二氫檞皮素和二氫楊梅素三種底物的活性。YLPSmDFR 和 YRWSmDFR 對(duì)于二氫楊梅素的活性均大于二氫檞皮素和二氫山奈酚，同

4、時(shí) YLPSmDFR 對(duì)于二氫楊梅素的活性要明顯大于 YRWSmDFR。這些結(jié)果表明，SmDFR 可能是造成茄子花青素差異的關(guān)鍵基因， 并且 YRWSmDFR 在 236 位的突變可能進(jìn)一步的削弱了酶活性。 Sm5GT 的 cDNA 長度為 1789bp，編碼區(qū)從 67-1479 共 1413bp，推導(dǎo)編碼 470 個(gè)氨基酸。推導(dǎo)氨基酸序列具有典型的 5GT 底物結(jié)合基序。Sm5GT 在云南紫長茄和云南圓白茄中的所有檢測(cè)組織中都有表達(dá)，