2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、ctrA在α-變形細菌中普遍存在,是細菌分裂周期和不對稱分化的調(diào)控因子,在雙組分調(diào)控系統(tǒng)中充當應(yīng)答調(diào)節(jié)子。類菌體的發(fā)育也涉及到根瘤菌的分裂分化過程,分析認為ctrA基因可能參與根瘤菌類菌體分化或共生固氮,亦可能接受宿主植物來源的控制作用。但是相關(guān)的研究報道和文獻很少。
   本實驗通過構(gòu)建同源雙交換置換載體pJQ200SK-ctrA,試圖直接篩選華癸中慢生根瘤菌7653R ctrA基因插入失活突變體。但是一直未能獲得預期的突變體

2、,考慮到ctrA基因可能存在突變致死性,本研究調(diào)整了篩選路線和策略,重新構(gòu)建了ctrA滲漏表達載體pHN-ctrA和雙交換質(zhì)粒,為后續(xù)篩選目標突變體奠定了基礎(chǔ)條件。
   另外一方面,通過構(gòu)建組成型表達載體pBBR-ctrA,通過接合轉(zhuǎn)移技術(shù),將額外拷貝的ctrA引入華癸根瘤菌7653R中,觀察根瘤菌自生條件和共生條件下的生長情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)其不影響7653R在自生培養(yǎng)時的生長;但是其共生表型為結(jié)瘤數(shù)量減少、固氮酶活性有所降低。熒

3、光定量PCR檢測ctrA表達量,結(jié)果表明:ctrA在自生和共生條件下呈組成型表達特點,且在不同時期根瘤中其表達水平差異不明顯。引入額外組成型拷貝ctrA可導致根瘤中的表達量稍增強。
   同時,以構(gòu)建pGBKT7-ctrA質(zhì)粒作為誘餌,通過酵母雙雜交技術(shù),篩選前期已構(gòu)建的紫云英AD-cDNA文庫。最終結(jié)果獲得4個陽性克隆,其中包括一個JUN激酶激活域結(jié)合蛋白。
   最后,基于ctrA box序列的保守性,本文對于華癸根

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