蟲(chóng)酰肼新衍生物生物活性測(cè)定和作用機(jī)理研究.pdf

1、本研究以蟲(chóng)酰肼為對(duì)照藥劑,采用浸葉法、浸蟲(chóng)法和點(diǎn)滴法測(cè)定了兩種蟲(chóng)酰肼新衍生物0593和0673對(duì)小菜蛾、斜紋夜蛾、甜菜夜蛾、棉鈴蟲(chóng)和玉米螟等五種主要鱗翅目害蟲(chóng)的室內(nèi)毒力,比較了作用方式差異；測(cè)定了蟲(chóng)酰肼新衍生物0593對(duì)甜菜夜蛾生長(zhǎng)發(fā)育的影響：研究了兩種蟲(chóng)酰肼新衍生物的作用機(jī)理,為兩種蟲(chóng)酰肼新衍生物0593和0673的開(kāi)發(fā)提供了直接的理論依據(jù)。主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1.蟲(chóng)酰肼新衍生物0593和0673對(duì)五種鱗翅目害蟲(chóng)的毒力明顯高于

2、其母體化合物蟲(chóng)酰肼。0593和0673對(duì)甜菜夜蛾4齡幼蟲(chóng)的觸殺毒力分別是蟲(chóng)酰肼的11.3倍和7.4倍；對(duì)斜紋夜蛾4齡幼蟲(chóng)觸殺毒力分別是蟲(chóng)酰肼的30.4倍和24.7倍；對(duì)小菜蛾3齡幼蟲(chóng)浸蟲(chóng)處理的毒力分別是蟲(chóng)酰肼的4.7倍和4.5倍；對(duì)棉鈴蟲(chóng)3齡幼蟲(chóng)的觸殺毒力分別是蟲(chóng)酰肼的15.5倍和15.2倍；對(duì)玉米螟4齡幼蟲(chóng)的觸殺毒力分別是蟲(chóng)酰肼的1.3倍和2.0倍；0593和0673對(duì)5種害蟲(chóng)的毒力也有較大差異。 2.兩種蟲(chóng)酰肼新衍生物059

3、3和0673的作用方式與蟲(chóng)酰肼相比,觸殺作用更強(qiáng)。0593和0673對(duì)甜菜夜蛾4齡幼蟲(chóng)的觸殺LD50分別為5.477μg/g和8.370μg/g,蟲(chóng)酰肼的LD50為61.663μg/g,0593和0673的觸殺毒力分別是蟲(chóng)酰肼的11.3倍和7.4倍。兩種蟲(chóng)酰肼新衍生物對(duì)甜菜夜蛾2齡幼蟲(chóng)的胃毒作用較蟲(chóng)酰肼也有較大提高,0593和0673的LC50分別為6.515μg/mL和8.944μg/mL,蟲(chóng)酰肼的LC50為14.418μg/mL,其

4、胃毒毒力分別是蟲(chóng)酰肼2.0倍和1.6倍。 0593和0673對(duì)斜紋夜蛾4齡幼蟲(chóng)的觸殺LD50分別為47.981μg/g和58.962μg/g,蟲(chóng)酰肼的LD50為1457.6μg/g,0593和0673的觸殺毒力分別是蟲(chóng)酰肼的30.4倍和24.7倍。兩種蟲(chóng)酰肼新衍生物對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲(chóng)的胃毒作用較蟲(chóng)酰肼也有較大提高,0593和0673的LC50分別為18.423μg/mL和17.098μg/mL,蟲(chóng)酰肼的LC50為53.534μg

5、/mL,其胃毒毒力分別是蟲(chóng)酰肼2.9倍和3.1倍。 3.蟲(chóng)酰肼和蟲(chóng)酰肼新衍生物0593處理甜菜夜蛾2齡幼蟲(chóng),能夠增加幼蟲(chóng)死亡率、降低化蛹率和羽化率,導(dǎo)致畸形蛹增加,降低單雌產(chǎn)卵量和卵孵化率。0593 0.2μg/mL、0.5μg/mL和蟲(chóng)酰肼0.5μg/mL處理后至化蛹的累計(jì)死亡率分別達(dá)44.0％、86.0％和.55.0％,明顯高于對(duì)照處理(20.0％)。同時(shí),各處理的化蛹率降低,分別為對(duì)照的。70％、17.5％和56.25％。

6、藥劑處理后,畸形蛹明顯增加,0.5gg/mL 0593處理的畸形率高達(dá)28.6％。對(duì)照的成蟲(chóng)羽化率為86.0％,0.2μg/mL、0.5μg/mL0593和蟲(chóng)酰肼處理后的成蟲(chóng)羽化率降低,分別為66.7％、46.4％和61.1％。與對(duì)照相比,處理試蟲(chóng)的單雌產(chǎn)卵量明顯降低,高濃度0593處理的試蟲(chóng)產(chǎn)卵量最少,單雌產(chǎn)卵量為259粒,僅為對(duì)照的57％,低濃度的0593和蟲(chóng)酰肼處理的試蟲(chóng)單雌產(chǎn)卵量分別為對(duì)照的64％和66％。卵的孵化率與對(duì)照有顯著

7、差異,0.2μg/mL、0.5μg/mL 0593和0.5μg/mL 蟲(chóng)酰肼處理后的卵孵化率分別為72.0％、59.1％和70.6％,對(duì)后代的繁殖力影響顯著。在相同濃度處理下,新衍生物0593較蟲(chóng)酰肼對(duì)甜菜夜蛾后代繁殖力的負(fù)面影響更大。 4.蟲(chóng)酰肼新衍生物0593和0673能夠不同程度地影響蟲(chóng)體內(nèi)各種酶系。首先,促進(jìn)試蟲(chóng)體內(nèi)幾丁質(zhì)酶的提前表達(dá),而且誘導(dǎo)其活性增加。處理后24h,0593、0673、蟲(chóng)酰肼的酶活力分別為3.1294

8、、2.83417和2.5120OD/mg pr.,分別是對(duì)照(1.5017 OD/mg pr.)的2.08、1.89和1.67倍；至48h酶比活力下降,其值分別為2.3073、2.0451和1.7501 OD/mg pr.;之后持續(xù)下降,72h時(shí)的值將為1.6775、1.0965和1.1174 OD/mg pr.,但這兩個(gè)時(shí)刻三個(gè)藥劑處理的幾丁質(zhì)酶比活力均高于對(duì)照處理(1.3012和0.6687 OD/mg pr.)。其次,抑制酚氧化酶

9、活性。藥劑處理24h后,各處理與對(duì)照差異不大,隨后活性降低,48h 0593和0673處理的酶比活力分別為0.1079和0.1297△OD/min·mg pr.,明顯低于蟲(chóng)酰肼(0.4991△OD/min·mg pr.)和對(duì)照(1.3624△OD/min·mg pr.),72h時(shí)0593和0673處理的比活力略有上升,但仍然低于蟲(chóng)酰肼和對(duì)照。第三,抑制纖維素酶活性。處理后24h,四個(gè)處理酶比活力沒(méi)有明顯差異,之后升高,至48h達(dá)最大值,

10、0593、0673、蟲(chóng)酰肼比活力依次升高,分別為對(duì)照的44％、67％和89％,72h時(shí),0593和0673處理的酶比活力有所降低,而蟲(chóng)酰肼和對(duì)照處理則持續(xù)上升。最后,誘導(dǎo)試蟲(chóng)體內(nèi)O-脫甲基酶的活性。新衍生物0593、0673處理試蟲(chóng)48h后酶活性分別為0.2191和0.2359 nmol/min·mgpr.,是對(duì)照的2.38倍和2.57倍。但與蟲(chóng)酰肼處理(0.6869 nmol/min·mg pr.)相比,其酶活性明顯受抑制。