胸骨骨髓細胞核DNA含量變化與死亡時間關系的研究.pdf

1、死亡時間是指從死亡發(fā)生到發(fā)現(xiàn)或檢查尸體時所經(jīng)歷的時間,又稱死后間隔時間(postmortem interval,PMI).在法醫(yī)學實踐中,死亡時間在多數(shù)情況下是案件發(fā)生時間的標志,并與有關的人和事緊密相關,因此,推斷死亡時間(estimation of the time since death)可為刑事案件的偵察工作提供線索,縮小偵察范圍,對確定兇犯和排除嫌疑人等有著非常重要的意義.同時,隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展,各項法律制度的不斷完善,死亡

2、時間推斷在財產(chǎn)繼承、保險及醫(yī)療糾紛等方面也具有一定的意義.因此,死亡時間推斷的研究一直是法醫(yī)病理學研究的重點和難點.DNA是細胞內(nèi)重要的遺傳物質(zhì),近年來的研究發(fā)現(xiàn),機體細胞核內(nèi)DNA的平均含量在同一物種的細胞內(nèi)是恒定的,并于死后發(fā)生變性降解,且隨死亡時間的延長逐漸下降.由于正常人體染色體數(shù)目是恒定的,細胞核DNA的含量也相對恒定,且不同組織細胞核中DNA平均含量基本一致.因此,測定人死后不同組織細胞核中DNA的含量變化可用于推斷死亡時間

3、.而骨髓組織受外層堅固的骨皮質(zhì)包繞,處于相對密閉的環(huán)境,受外界條件變化的影響較小,腐敗過程亦較為緩慢.因此,可望通過對人死后不同時間骨髓細胞核DNA含量的測定來推斷較晚期尸體死亡時間.基于以上研究,該試驗著眼于腐敗尸體死亡時間推斷這一難題,選擇法醫(yī)學檢案中最容易獲得的檢材——胸骨標本作為研究對象,應用DNA高度特異性染色方法——改良的Feulgen法,結合計算機圖像分析技術,對人死后胸骨骨髓細胞核DNA含量變化與死亡時間的關系進行研究.

4、材料和方法:收集因交通事故死亡的不同個體共150例,死者年齡20-40歲之間,其中男性86例,女性64例,按年齡、性別、死后放置時間不同隨機分為一個對照組和十四個試驗組,每組十例.對照組為新鮮尸體取材后立即入10％福爾馬林液固定,試驗組胸骨置于24℃恒溫箱內(nèi),按組別不同分別放置1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14天,再取胸骨柄段常規(guī)10%福爾馬林液固定.標本經(jīng)10%硝酸脫鈣、常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片處理,分別

5、進行HE染色和改良的Feulgen法DNA特異性染色,對染色結果作形態(tài)學觀察和計算機圖像分析,所得數(shù)據(jù)輸入Microsoft Excel數(shù)據(jù)庫,應用美國社會科學統(tǒng)計軟件包10.0(statistics package of social science,SPSS10.0)對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理.結論:1.胸骨骨髓細胞核DNA含量隨死亡時間延長呈規(guī)律性下降,在死后1-6天DNA降解速率較快,以后呈緩慢持續(xù)的下降趨勢.2.Feulgen染色法