加味清腸解毒湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠炎癥細(xì)胞因子及血小板活化功能的影響.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br>　　通過(guò)觀察加味清腸解毒湯對(duì)TNBS/乙醇復(fù)制的潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的炎癥細(xì)胞因子相關(guān)指標(biāo)及血小板活化功能的影響來(lái)研究其治療作用和機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　SPF級(jí)SD大鼠60只隨機(jī)分為空白組、模型組、西藥組、中藥高劑量組（簡(jiǎn)稱高劑量組）、中藥中劑量組（簡(jiǎn)稱中劑量組）、中藥低劑量組（簡(jiǎn)稱低劑量組），每組10只。除空白組外，其余采用TNBS/乙醇復(fù)制潰瘍性結(jié)腸炎模型。第一次造模后第5周起給藥，連續(xù)兩周，空白

2、組、模型組給予等體積生理鹽水灌胃，西藥組給予美沙拉嗪緩釋顆粒灌胃，中藥各治療組給予加味清腸解毒湯水煎液灌胃。給藥第7天采血檢測(cè)TNF-α、TXB2、6-Keto-PGF1α含量；給藥第14天采血檢測(cè)TNF-α、TXB2、6-Keto-PGF1α、PC含量；給藥2周后處死所有動(dòng)物，分別進(jìn)行結(jié)腸組織病理學(xué)評(píng)分，免疫組化法檢測(cè)結(jié)腸組織IL-1β、IL-6、IL-8的表達(dá)，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)結(jié)腸組織IL-10的表達(dá)，以及PCR檢測(cè)結(jié)腸組織TLR4、

3、NF-κB的基因表達(dá)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　?。?）采用TNBS/乙醇復(fù)制大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，造模后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)典型的腹瀉、血便、體重減輕、精神萎靡等表現(xiàn)，經(jīng)治療后上述情況逐漸好轉(zhuǎn)；與模型組比較，各治療組體重恢復(fù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01，P＜0.05）；
　?。?）與空白組比較，模型組結(jié)腸組織損傷符合典型的UC特征，病理學(xué)評(píng)分顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各治療組病理學(xué)評(píng)分明顯下降（P＜0.01，P＜0.0

4、5）；
　?。?）與空白組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-1β表達(dá)明顯升高（P＜0.01）；與模型對(duì)照組相比，各治療組大鼠結(jié)腸組織IL-1β表達(dá)降低，（P＜0.05，P＜0.01）；
　?。?）與空白組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-6表達(dá)明顯升高（P＜0.01）；與模型組相比，各治療組大鼠結(jié)腸組織IL-6表達(dá)降低（P＜0.05）；
　?。?）與空白組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-8表達(dá)明顯升高（P＜0.01）；與模型組相

5、比，各治療組大鼠結(jié)腸組織IL-8表達(dá)降低（P<0.05，P<0.01）；
　　（6）空白組不同時(shí)間點(diǎn)之間比較，TNF-α的表達(dá)無(wú)明顯差異（P＞0.05）；不同時(shí)間點(diǎn)模型組TNF-α的表達(dá)較空白組明顯增多（P＜0.01）；與模型組比較，不同時(shí)間點(diǎn)除低劑量組之外其余治療組的TNF-α的表達(dá)下調(diào)（P＜0.01，P＜0.05）；
　?。?）與空白組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-10含量明顯降低（P＜0.01）；與模型組相比，各治療組

6、除低劑量組外IL-10的含量有所升高（P＜0.05，P＜0.01）；
　?。?）與空白組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織TLR4、NF-κB的mRNA表達(dá)增強(qiáng)（P＜0.01）；與模型組比較，西藥組和中藥組大鼠結(jié)腸組織中的TLR4、NF-κB的mRNA表達(dá)下降（P＜0.01）；西藥組與中藥組比較無(wú)顯著差異（P＞0.05）；
　?。?）與空白組比較，模型組大鼠PC顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各治療組PC有所下降，其中西藥組、

7、中藥高劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；
　?。?0）空白組組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)比較，血漿TXB2含量無(wú)明顯差異（P＞0.05）；與空白組相比，模型組不同時(shí)間點(diǎn)血漿TXB2含量顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，除低劑量組外，其余各組不同時(shí)間點(diǎn)血漿TXB2含量下降（P＜0.01，P＜0.05）；
　?。?1）空白組組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)比較血漿6-Keto-PGF1α含量無(wú)明顯差異（P＞0.05）；與空白組比較，模型組不同時(shí)間點(diǎn)血漿6

8、-Keto-PGF1α含量升高（P＜0.05）；與模型組比較，各治療組不同時(shí)間點(diǎn)血漿6-Keto-PGF1α含量升高（P＜0.05，P＜0.01）；
　?。?2）空白組組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)比較，TXB2/6-Keto-PGF1α比值無(wú)明顯差異（P＞0.05）；與空白組比較，模型組不同時(shí)間點(diǎn)TXB2/6-Keto-PGF1α比值顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各治療組不同時(shí)間點(diǎn)TXB2/6-Keto-PGF1α比值降低（P＜0.0

9、1，P＜0.05）；
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
　?。?）加味清腸解毒湯具有改善實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎組織病理學(xué)評(píng)分，改善一般情況，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)大鼠體重恢復(fù)的作用；
　　（2）加味清腸解毒湯降低促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的過(guò)度表達(dá)，升高抗炎因子IL-10的表達(dá)，可能是其治療TNBS/乙醇復(fù)制的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的機(jī)制之一；
　?。?）加味清腸解毒湯治療實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎的機(jī)制可能與通過(guò)抑制TLR4、NF-κB