加味清腸解毒湯對潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠炎癥細胞因子及血小板活化功能的影響.pdf

1、實驗目的：
　　通過觀察加味清腸解毒湯對TNBS/乙醇復制的潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的炎癥細胞因子相關(guān)指標及血小板活化功能的影響來研究其治療作用和機制。
　　實驗方法：
　　SPF級SD大鼠60只隨機分為空白組、模型組、西藥組、中藥高劑量組（簡稱高劑量組）、中藥中劑量組（簡稱中劑量組）、中藥低劑量組（簡稱低劑量組），每組10只。除空白組外，其余采用TNBS/乙醇復制潰瘍性結(jié)腸炎模型。第一次造模后第5周起給藥，連續(xù)兩周，空白

2、組、模型組給予等體積生理鹽水灌胃，西藥組給予美沙拉嗪緩釋顆粒灌胃，中藥各治療組給予加味清腸解毒湯水煎液灌胃。給藥第7天采血檢測TNF-α、TXB2、6-Keto-PGF1α含量；給藥第14天采血檢測TNF-α、TXB2、6-Keto-PGF1α、PC含量；給藥2周后處死所有動物，分別進行結(jié)腸組織病理學評分，免疫組化法檢測結(jié)腸組織IL-1β、IL-6、IL-8的表達，酶聯(lián)免疫法檢測結(jié)腸組織IL-10的表達，以及PCR檢測結(jié)腸組織TLR4、

3、NF-κB的基因表達。
　　實驗結(jié)果：
　?。?）采用TNBS/乙醇復制大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，造模后實驗動物出現(xiàn)典型的腹瀉、血便、體重減輕、精神萎靡等表現(xiàn)，經(jīng)治療后上述情況逐漸好轉(zhuǎn)；與模型組比較，各治療組體重恢復有統(tǒng)計學差異（P＜0.01，P＜0.05）；
　　（2）與空白組比較，模型組結(jié)腸組織損傷符合典型的UC特征，病理學評分顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各治療組病理學評分明顯下降（P＜0.01，P＜0.0

4、5）；
　?。?）與空白組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-1β表達明顯升高（P＜0.01）；與模型對照組相比，各治療組大鼠結(jié)腸組織IL-1β表達降低，（P＜0.05，P＜0.01）；
　?。?）與空白組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-6表達明顯升高（P＜0.01）；與模型組相比，各治療組大鼠結(jié)腸組織IL-6表達降低（P＜0.05）；
　　（5）與空白組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-8表達明顯升高（P＜0.01）；與模型組相

5、比，各治療組大鼠結(jié)腸組織IL-8表達降低（P<0.05，P<0.01）；
　?。?）空白組不同時間點之間比較，TNF-α的表達無明顯差異（P＞0.05）；不同時間點模型組TNF-α的表達較空白組明顯增多（P＜0.01）；與模型組比較，不同時間點除低劑量組之外其余治療組的TNF-α的表達下調(diào)（P＜0.01，P＜0.05）；
　?。?）與空白組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-10含量明顯降低（P＜0.01）；與模型組相比，各治療組

6、除低劑量組外IL-10的含量有所升高（P＜0.05，P＜0.01）；
　?。?）與空白組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織TLR4、NF-κB的mRNA表達增強（P＜0.01）；與模型組比較，西藥組和中藥組大鼠結(jié)腸組織中的TLR4、NF-κB的mRNA表達下降（P＜0.01）；西藥組與中藥組比較無顯著差異（P＞0.05）；
　?。?）與空白組比較，模型組大鼠PC顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各治療組PC有所下降，其中西藥組、

7、中藥高劑量組有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）；
　?。?0）空白組組內(nèi)不同時間點比較，血漿TXB2含量無明顯差異（P＞0.05）；與空白組相比，模型組不同時間點血漿TXB2含量顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，除低劑量組外，其余各組不同時間點血漿TXB2含量下降（P＜0.01，P＜0.05）；
　?。?1）空白組組內(nèi)各時間點比較血漿6-Keto-PGF1α含量無明顯差異（P＞0.05）；與空白組比較，模型組不同時間點血漿6

8、-Keto-PGF1α含量升高（P＜0.05）；與模型組比較，各治療組不同時間點血漿6-Keto-PGF1α含量升高（P＜0.05，P＜0.01）；
　?。?2）空白組組內(nèi)不同時間點比較，TXB2/6-Keto-PGF1α比值無明顯差異（P＞0.05）；與空白組比較，模型組不同時間點TXB2/6-Keto-PGF1α比值顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各治療組不同時間點TXB2/6-Keto-PGF1α比值降低（P＜0.0

9、1，P＜0.05）；
　　實驗結(jié)論：
　　（1）加味清腸解毒湯具有改善實驗性潰瘍性結(jié)腸炎組織病理學評分，改善一般情況，促進實驗大鼠體重恢復的作用；
　?。?）加味清腸解毒湯降低促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的過度表達，升高抗炎因子IL-10的表達，可能是其治療TNBS/乙醇復制的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的機制之一；
　?。?）加味清腸解毒湯治療實驗性潰瘍性結(jié)腸炎的機制可能與通過抑制TLR4、NF-κB