翁連解毒湯對潰瘍性結腸炎大鼠IL-17、TLR2的影響.pdf

1、目的：潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）是發(fā)生在直腸和結腸的、累及黏膜及黏膜下層的慢性非特異性炎癥性疾病，發(fā)病率高，且易復發(fā)，病程較長。本實驗通過觀察翁連解毒湯方對潰瘍性結腸炎大鼠的一般狀態(tài)、疾病活動指數(shù)（DAI）評分、血清IL-17含量及結腸組織TLR2表達的影響，探討翁連解毒湯治療潰瘍性結腸炎的作用機制，為臨床應用提供實驗依據(jù)。
　　方法：將60只潔凈雄性健康Wistar大鼠根據(jù)隨機數(shù)字表隨機分為6組，

2、每組10只，分別為空白對照組（NG）、模型組（MG）、西藥美沙拉嗪組（XG）、中藥高劑量組（HG）、中藥中劑量組（ZG）、中藥低劑量組（LG）?？瞻讓φ战M（NG）正常飼養(yǎng)，其余5組大鼠均采用三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇聯(lián)合造模方法建立潰瘍性結腸炎大鼠模型。自造模后第4天，各組大鼠除NG、MG正常飼養(yǎng)外，余治療組大鼠除基礎飼養(yǎng)外合用藥物灌胃，其中XG組大鼠采取美沙拉嗪混懸液灌胃，HG、ZG和LG大鼠采用不同的濃度的翁連解毒湯灌胃治療。連

3、續(xù)治療2周后，觀察大鼠在各個時期的精神狀態(tài)、飲食、被毛、糞便性狀、體重等一般狀態(tài)的變化并記錄，做出疾病活動指數(shù)評分表。治療結束后，各組大鼠禁食不禁水24小時，利多卡因麻醉大鼠取股動脈血，用雙抗體夾心ABC-ELLISA法檢測血清IL-17含量，解剖并取其肉眼觀察病變較重部位的結腸組織，常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色，檢測TLR2的表達情況。
　　結果：
　　1、一般情況觀察：NG大鼠一般狀態(tài)良好，余組大鼠精神萎靡，反應遲鈍，進

4、食水量減少，體重下降，糞便稀薄夾雜粘液、膿血。藥物灌胃治療后各組大鼠精神狀態(tài)好轉，進食量明顯增多，體重下降減慢，粘液、膿血便減少或消失，其中HG改善最明顯，ZG、XG改善無明顯差異，較HG略差，較LG較好。
　　DAI評分結果提示：XG、HG、ZG、LG與MG相比較低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；XG、ZG、LG與HG相比較高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；XG與ZG無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;XG、ZG與LG相比較低

5、，差異有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2、結腸黏膜肉眼與病理學觀察
　　肉眼觀察：NG大鼠上皮黏膜光滑完整。MG大鼠黏膜充血水腫糜爛面最明顯。HG大鼠黏膜較光滑，潰瘍面極少。XG和ZG大鼠黏膜欠光滑，可見較少的潰瘍面。LG大鼠黏膜組織輕度充血水腫，潰瘍灶較多。
　　組織病理學觀察：NG大鼠黏膜光滑，腺體結構排列規(guī)則。MG大鼠黏膜粗糙，可見多發(fā)、彌漫性糜爛或潰瘍面，局部腺體破壞最明顯，可見大量炎性細胞浸潤。HG組黏膜

6、較光滑完整，新生腺體最多。XG和ZG大鼠黏膜欠光滑，可見少許炎性細胞浸潤，潰瘍面較少。LG大鼠黏膜組織輕度充血水腫，遺留潰瘍灶較多，少數(shù)處于愈合期，潰瘍面及邊緣覆于少量新生腺體，見附圖Fig.1-Fig.12。
　　3、指標檢測
　　IL-17含量比較：MG、XG、HG、ZG、LG與NG相比含量較高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；HG、XG、ZG、LG與 MG相比，含量較低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）； XG、ZG

7、、LG與HG相比含量較高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；XG、ZG與LG相比含量較低，且差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；XG與ZG相比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　TLR2表達比較：MG、XG、HG、ZG、LG與 NG相比表達較高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；XG、HG、ZG、LG與 MG相比，表達較低，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；HG較XG、ZG、LG相比，表達較低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.0

8、5）；ZG、XG與LG相比，表達較低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；XG與ZG相比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　結論：
　　翁連解毒湯能夠改善潰瘍性結腸炎大鼠的一般情況并且能夠修復損傷的黏膜，降低DAI評分，并呈現(xiàn)一定的量-效關系，其特點為隨著中藥濃度的升高而療效增加，其作用機制可能通過降低TLR2的表達、減少IL-17的含量，從而阻斷炎癥反應，減少炎性細胞浸潤，刺激局部組織再生與修復，達到愈合潰瘍面的作用