甘藍型油菜波里馬細胞質(zhì)雄性不育恢復(fù)基因Rfp的分子標記篩選與初步定位.pdf

1、細胞質(zhì)雄性不育(CMS)是油菜雜種優(yōu)勢利用的一條重要途徑。甘藍型油菜波里馬細胞質(zhì)雄性不育(pol CMS)則是甘藍型油菜主要的CMS類型之一,在國內(nèi)外被廣泛應(yīng)用于三系或兩系雜交種選育。目前,國內(nèi)外利用pol CMS已經(jīng)育成了大量優(yōu)良的雜交品種,并大面積推廣應(yīng)用。已有研究表明:pol CMS為孢子體不育類型,其不育性與細胞質(zhì)基因atp6/orf224的表達有關(guān),細胞核內(nèi)則存在其恢復(fù)基因。鑒于核內(nèi)恢復(fù)基因在pol CMS三系或兩系雜種優(yōu)勢利

2、用中發(fā)揮著不可或缺的作用,克隆恢復(fù)基因在育種應(yīng)用以及雄性不育恢復(fù)機理研究中均具有十分重要的意義。本研究以連續(xù)回交構(gòu)建的pol CMS育性恢復(fù)基因近等基因系群體為材料,篩選了與恢復(fù)基因(Rfp)緊密連鎖的分子標記,并對其進行了初步的圖譜定位,以便為進一步的精細定位與克隆奠定基礎(chǔ)。獲得的主要結(jié)果如下:
　　 1.選擇可育基因型單株S(Rfprfp)去雄與輪回親本N(rfprfp)連續(xù)回交獲得含980株可育株,1044株不育株的BC1

3、2F1群體(X2檢驗符合1:1的理論分離比),成功構(gòu)建了攜帶有pol CMS恢復(fù)基因的近等基因系。
　　 2.采用分離群體集團混合分析法(BSA),篩選了3840對AFLP引物,獲得與Rfp緊密連鎖的AFLP標記15個,這些標記位于Rfp基因的同一側(cè),最近的標記與Rfp遺傳距離為0.65cM。
　　 3.與Rfp遺傳距離最近的4個AFLP標記被成功轉(zhuǎn)化成SCAR標記(SCCQ1至SCCQ4),其中標記SCCQ1、SCCQ