甘藍(lán)型油菜顯性細(xì)胞核雄性不育基因和上位抑制基因的分子標(biāo)記及其應(yīng)用.pdf

1、該研究以甘藍(lán)型油菜顯性細(xì)胞核雄性不育純合兩型系Rs1046AB為親本,與不同來源的甘藍(lán)型油菜品種(品系)進(jìn)行雜交或回交,開展的研究內(nèi)容包括:顯性細(xì)胞核雄性不育的遺傳分析;顯性細(xì)胞核雄性不育在不同細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和環(huán)境條件下的遺傳表現(xiàn);顯性核不育基因的圖譜定位;上位抑制基因的圖譜定位;顯性細(xì)胞核雄性不育"三系"的分子標(biāo)記輔助選擇育種等.取得的主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.經(jīng)測交分析,從14份甘藍(lán)型油菜品種(品系)中篩選到3份帶有抑制基因的材料,它們

2、可以作為顯性細(xì)胞核雄性不育系的恢復(fù)系,其余11份材料不帶有抑制基因,可能是雙穩(wěn)性類型,可以作為顯性細(xì)胞核雄性不育系的臨時(shí)保持系.2.以Rs1046B為共同母本,與不同來源的品種(品系)組配了11個(gè)同質(zhì)異核的雜交組合.3.以Rs1046B為親本之一,與2份雙隱性材料一共配制了6對正反交組合,運(yùn)用最小差數(shù)法和成對數(shù)據(jù)法對各組合的不育株率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)正反交組合的育種性差異不顯著.由此說明,顯性細(xì)胞核雄性不育的育性表達(dá)不受細(xì)胞質(zhì)的影響

3、.4.將7個(gè)雜交組合種植于蘭州(5月至10月)和武昌(10月至次年5月)兩地并進(jìn)行育性對比觀察,結(jié)果發(fā)現(xiàn)部分雜交組合后代的不育株率在兩地相差較大,在蘭州的生態(tài)條件下不育株率接近正常的50﹪,而在武昌的生態(tài)條件下不育株率大為降低.這說明,不同的生態(tài)環(huán)境條件對顯性細(xì)胞核雄性不育的育性表現(xiàn)存在一定的影響.5.在個(gè)別組合F<,1>不育株(Msmsrfrf)上發(fā)現(xiàn)有少量的部分可育花,將其自交,后代發(fā)生1:1的育性分離,繼續(xù)兄妹交可以選育到雜合兩型

4、系.6.在回交分離群體[(Rs1046A×"Samourai")×"Samourai"]中,運(yùn)用BSA法構(gòu)建了不育集團(tuán)和可育集團(tuán),在兩個(gè)集團(tuán)之間一共篩選了480對AFLP引物,找到了5個(gè)與不育基因緊密連鎖的AFLP標(biāo)記.7.在兄妹交群體(Rs1046A×Rs1046B)中運(yùn)用BSA法構(gòu)建了不育集團(tuán)和可育集團(tuán),在2個(gè)集團(tuán)間一共篩選了640條RAPD引物和1024對AFLP引物,最后找到了一個(gè)與抑制基因緊密連鎖的AFLP標(biāo)記E16MG4<,

5、205>,該標(biāo)記與抑制基因之間的交換率僅為6.1﹪.將標(biāo)記差異片段進(jìn)行了回收、克隆和測序,序列分析和BLAST搜索結(jié)果表明,標(biāo)記片段包含有一個(gè)ORF結(jié)構(gòu)區(qū),該ORF區(qū)編碼的34個(gè)氨基酸序列與4個(gè)來源于擬南芥的蛋白質(zhì)高度相似,但其具體功能不詳.8.利用BC<,1>群體[(Rs1046A×"Samourai")×"Samourai"]構(gòu)建了一個(gè)包含18個(gè)主要連鎖群、2個(gè)三聯(lián)體和1個(gè)連鎖對的甘藍(lán)型油菜分子標(biāo)記遺傳圖譜,圖譜總長2667.1cM