水介質(zhì)高穩(wěn)定多西環(huán)素金屬配合物的合成及其生物效應(yīng).pdf

1、多西環(huán)素是半合成的四環(huán)素類抗生素，除了具有抗菌活性外，還具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、抗纖維化、抑制血管增生和重構(gòu)等多種生物活性。多西環(huán)素可與鈀等金屬離子結(jié)合形成抗菌活性更強(qiáng)的配合物，但對(duì)配合物的研究大部分局限于抗菌活性，而其他研究甚少。本試驗(yàn)合成了多種多西環(huán)素金屬配合物，考察了其在水介質(zhì)條件下的熱加速和光加速的穩(wěn)定性，研究了配合物的體外抗菌活性和抗腫瘤活性以及其安全性。
　　 本課題合成了以多西環(huán)素為配體的Mg2+、Zn2+、Cu

2、2+和Al3+四種金屬離子配合物，經(jīng)金屬元素分析、UV和IR分析，推測(cè)配合物可能的結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明金屬離子可能與多西環(huán)素A環(huán)上的酰胺氧原子和羥基氧原子配位分別形成了1∶1(Mg2+、Cu2+)和2∶1(Zn2+、Al3+)的配合物。
　　 通過熱加速和光加速試驗(yàn)比較它們?cè)谒橘|(zhì)中的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，高溫和強(qiáng)光照對(duì)多西環(huán)素及其金屬離子配合物的穩(wěn)定性均有明顯影響，其中，與多西環(huán)素相比，在高溫條件下，多西環(huán)素鋅的終含量比多西環(huán)素高3

3、6.12％，多西環(huán)素鋁的終含量比多西環(huán)素高10.95％，在強(qiáng)光照條件下，多西環(huán)素鋅的終含量比多西環(huán)素高25.85％。
　　 以倍比稀釋法對(duì)多西環(huán)素及其配合物進(jìn)行體外抗菌活性測(cè)試，檢測(cè)其對(duì)金黃色葡萄球菌(S.aureus)，枯草桿菌(B.subtilis)，大腸桿菌(E.coli)和沙門氏菌(SE)的最小抑菌濃度(MIC)。結(jié)果表明，多西環(huán)素對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌的MIC分別為0.625μg/mL、10μg

4、/mL、10μg/mL、10μg/mL，4種金屬離子配合物對(duì)這兩種G+和這兩種G-均有較好的抗菌活性。其中，多西環(huán)素鎂和多西環(huán)素鋅對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC值為0.3125μg/mL，抗菌活性是多西環(huán)素的2倍，對(duì)枯草桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌的MIC值均為10μg/mL，與多西環(huán)素相同;而多西環(huán)素銅和多西環(huán)素鋁對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC值與多西環(huán)素一致，對(duì)枯草桿菌、大腸桿菌和沙門氏菌的活性雖不如多西環(huán)素，但也具有較好的抗菌作用。
　　

5、 采用MTT法測(cè)定多西環(huán)素及其配合物對(duì)肺癌細(xì)胞A549和肝癌細(xì)胞HepG2的細(xì)胞毒性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在低濃度(40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL)時(shí)，多西環(huán)素鎂、多西環(huán)素鋅、多西環(huán)素銅和多西環(huán)素鋁對(duì)A549和HepG2兩種腫瘤細(xì)胞的抑制活性均弱于多西環(huán)素(分別為44.3％，26.8％，21.8％和48.9％，36.2％，19.4％);當(dāng)濃度達(dá)80μg/mL時(shí)，除了多西環(huán)素鋁，其余3種配合物對(duì)A549和HepG2細(xì)胞的抑制效率

6、均高于多西環(huán)素本身（72.55％和82.4％），其中，多西環(huán)素銅對(duì)A549和HepG2細(xì)胞的抑制效率高達(dá)94.4％和92.5％，明顯強(qiáng)于多西環(huán)素。
　　 通過急性毒性試驗(yàn)、刺激性試驗(yàn)和溶血性試驗(yàn)對(duì)其安全性進(jìn)行初步的評(píng)價(jià)。急性毒性試驗(yàn)中，多西環(huán)素及其金屬離子配合物經(jīng)小鼠口服給藥后LD50＞2000mg/kg，根據(jù)固定計(jì)量法試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，多西環(huán)素及其金屬離子配合物無嚴(yán)重急性中毒的危險(xiǎn)性;在刺激性試驗(yàn)中，多西環(huán)素對(duì)血管的刺激性為

7、3級(jí)反應(yīng)，對(duì)肌肉的刺激性為2級(jí)反應(yīng)，而4種多西環(huán)素金屬離子配合物對(duì)血管的刺激性為1級(jí)反應(yīng)，對(duì)肌肉的刺激性為0級(jí)反應(yīng);在溶血性試驗(yàn)中，除了多西環(huán)素外，其余4種配合物均無溶血現(xiàn)象發(fā)生。試驗(yàn)結(jié)果表明，4種配合物與多西環(huán)素一樣，無嚴(yán)重急性中毒的危險(xiǎn)性，而與多西環(huán)素相比，配合物的刺激性和溶血性均減弱，安全性有所增加。
　　 本課題所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，合成得到的多西環(huán)素鋅配合物，具有比多西環(huán)素更強(qiáng)的抗菌活性和抗腫瘤活性，更高的安全性以及更好的