TIMP1-2和TGF-β1siRNA對肝纖維化大鼠PDGF-ERK信號通路的影響.pdf

1、目的:研究TIMP-1/2和TGF-β1 siRNA分別經(jīng)體內(nèi)轉(zhuǎn)染后對肝纖維化大鼠PDGF/ERK信號通路的影響。
　　方法:將60只雄性SD大鼠隨機分為6組:模型組、陰性對照組、TIMP-1 siRNA治療組、TIMP-2 siRNA治療組、TGF-β1 siRNA治療組以及正常對照組。除正常組外，其余各組均給予40％四氯化碳皮下注射誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型。同時從大鼠尾靜脈分別按0.25mg/Kg體重注射陰性對照質(zhì)粒、TIMP-1

2、 siRNA、TIMP-2 siRNA、TGF-β1 siRNA質(zhì)粒，正常組與模型組注射相同劑量的無菌生理鹽水，每周兩次。12周后處死大鼠，取肝組織樣本，應(yīng)用HE及天狼星紅染色驗證大鼠肝臟病理及纖維化程度;分別采用Real-Time PCR、免疫組化及Western blot檢測PDGF-BB、PDGFRβ及下游信號通路上關(guān)鍵信號分子p-ERK1/2在大鼠肝組織的表達。
　　結(jié)果:病理組織學(xué)顯示，TIMP-1、TIMP-2和TGF

3、-β1 siRNA處理組大鼠肝纖維化程度較模型組與陰性對照組均明顯減輕;與正常組相比，模型組、陰性對照組及各siRNA處理組大鼠肝組織中PDGF-BB、PDGF Rβ及ERK1/2的表達明顯升高(P＜0.05);與模型組、陰性對照組相比，TIMP-1、TIMP-2及TGF-β1 siRNA能明顯抑制肝組織中PDGF-BB、PDGFRβ及p-ERK1/2的表達(P＜0.05);各siRNA處理組兩兩比較，PDGF-BB及PDGFRβ的表達

4、無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，但p-ERK1/2在TGF-β1 siRNA處理組中的表達顯著高于TIMP-1或TIMP-2 siRNA處理組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:在體內(nèi)試驗中，TIMP-1/2、TGF-β1 siRNA均能有效地下調(diào)肝組織中PDGF-BB及其受體、p-ERK1/2的表達，通過抑制PDGF-BB激活的ERK信號通路來抑制HSCs的增殖是其改善肝纖維化的可能機制，而p-ERK1/2在TIMPs siRNA組的低