粗壯脈紋孢菌降解富含纖維的農(nóng)副產(chǎn)品及其降解產(chǎn)物發(fā)酵產(chǎn)乙醇的研究.pdf

1、本研究利用實(shí)驗(yàn)室早期自行篩選分離并誘變得到的高產(chǎn)纖維素酶優(yōu)良菌株——粗壯脈紋孢菌（Neurospora.crassa）作為纖維素酶的生產(chǎn)菌株，利用江西本土產(chǎn)量較大富含纖維的農(nóng)副產(chǎn)品作為基料進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，通過優(yōu)化培養(yǎng)基的組成來提高纖維素酶的活力，并研究了培養(yǎng)條件對纖維素降解情況的影響。通過氣相色譜法對纖維降解物中的單糖組成進(jìn)行了分離鑒定。并篩選出豆皮酒糟纖維降解物乙醇發(fā)酵的酵母菌種和發(fā)酵方式，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以為纖維乙醇的高效生產(chǎn)提供一定的科學(xué)

2、依據(jù)。主要結(jié)果如下：
　　1.以豆皮、豆渣、米糠、啤酒糟、酒糟五種富含纖維的農(nóng)副產(chǎn)品為原料，利用實(shí)驗(yàn)室自行分離篩選的誘變的粗壯脈紋孢菌菌株先單獨(dú)發(fā)酵，再兩兩混合，結(jié)果表明，當(dāng)豆皮與酒糟、豆渣混合發(fā)酵時，纖維素酶的活力最高。通過Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)確定豆皮、酒糟和硫酸銨的添加量是纖維素酶活的主要影響因子。通過最陡爬坡試驗(yàn)和響應(yīng)面優(yōu)化確定最佳培養(yǎng)基配方為：豆皮64％，酒糟34%，硫酸銨2%。在此條件下，纖維素酶活提高了1

3、41.88%，由最初的1.17IU/g提高到2.86IU/g。
　　2.經(jīng)單因素設(shè)計(jì)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化Neurospora.crassa降解纖維原料產(chǎn)可發(fā)酵糖的培養(yǎng)條件，得到最優(yōu)提取培養(yǎng)條件為：發(fā)酵初始pH為5.5，初始含水量110%，發(fā)酵溫度為30℃，接種量3.5 mL，在此優(yōu)化培養(yǎng)條件及最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成下，在培養(yǎng)60h后的還原糖的產(chǎn)量最高，為182.43 mg/g。
　　3.對纖維降解物中可發(fā)酵糖進(jìn)行了純化，并對單糖組成進(jìn)

4、行了鑒定。結(jié)果表明，氣象色譜法對單糖的組分分離效果好，檢測到降解物中含有兩種單糖，對比標(biāo)品后鑒定為葡萄糖和木糖，其含量分別為56.03%和30.52%。
　　4.對釀酒酵母、熱帶假絲酵母、東方伊薩酵母三種不同的乙醇生產(chǎn)菌利用纖維降解物發(fā)酵乙醇能力進(jìn)行比較，篩選出東方伊薩酵母為纖維乙醇的最佳發(fā)酵菌株。對比分步糖化發(fā)酵、同步糖化發(fā)酵和非等溫同步糖化發(fā)酵三種不同的乙醇發(fā)酵方式，確定非等溫同步發(fā)酵為纖維乙醇的最佳發(fā)酵方式。
　　5.