烏龍茶多酚及其兒茶素單體抑制消化相關(guān)酶的活性及其機(jī)制的研究.pdf

1、肥胖是因?yàn)橹炯?xì)胞中脂肪合成代謝大于分解代謝引起脂肪異常蓄積的結(jié)果，通過(guò)減少血液中的葡萄糖、脂肪酸及膽固醇的濃度或是通過(guò)促進(jìn)體內(nèi)脂肪分解代謝都將達(dá)到一定的減肥效果。
　　自古以來(lái)，烏龍茶都具有減肥的功效。烏龍茶是我國(guó)獨(dú)有的一種半發(fā)酵茶，其生產(chǎn)歷史源遠(yuǎn)流長(zhǎng)，在國(guó)內(nèi)外享有盛譽(yù)。烏龍茶含有的化學(xué)成分復(fù)雜，主要有茶多酚、色素、生物堿、氨基酸、碳水化合物等。而茶多酚是烏龍茶的主要成分，也是烏龍茶減肥功能的首要成分。近年來(lái)，大量研究已經(jīng)證實(shí)，

2、茶多酚兒茶素中含量最多的EGCG單體，及甲基化形式的EGCG3"Me，發(fā)揮了重要作用。
　　鑒于當(dāng)前研究現(xiàn)狀，本研究以中國(guó)烏龍茶為原料，對(duì)烏龍茶多酚及其單體提取分離純化，分別對(duì)α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶等消化酶及牛血清蛋白的抑制與結(jié)合作用進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下:
　　1.烏龍茶多酚、EGCG及EGCG3"Me的分離及純化。從特定品種的烏龍茶中，
　　分離純化得到茶多酚混合物、EGCG單體及EGCG3"M

3、e單體。選取適當(dāng)?shù)拇罂讟渲?PA)吸附烏龍茶多酚，用水沖洗去除咖啡堿后，乙醇解吸附，可得到純度較高的茶多酚混合物。再對(duì)茶多酚混合物上樣，過(guò)特定的大孔樹脂(HW-40)，以乙醇洗脫并分部收集，可得到純度大于95％的EGCG單體及EGCG3"Me單體，并通過(guò)ESI-TOF-MS和1H-NMR確定單體的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
　　2.烏龍茶多酚、EGCG及EGCG3"Me對(duì)α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶等消化酶的活性抑制作用及結(jié)合方式研究。以

4、茶多酚混合物、EGCG和EGCG3"Me單體為樣品，研究其對(duì)消化酶活性的抑制作用及相互作用后的紫外和熒光猝滅作用。通過(guò)酶動(dòng)力學(xué)研究樣品抑制劑對(duì)消化酶活性的抑制率及抑制類型等。在紫外分光光度計(jì)測(cè)定下，三種樣品對(duì)三種消化酶的作用均能是其產(chǎn)生結(jié)構(gòu)的變化，發(fā)生波長(zhǎng)位移。通過(guò)熒光分光光度計(jì)，分析了三種消化酶的3D熒光圖譜和加入樣品后對(duì)消化酶結(jié)構(gòu)的影響，進(jìn)一步分析了樣品對(duì)酶的猝滅作用類型等。其結(jié)果表明，三種樣品均有良好的對(duì)消化酶的抑制作用和猝滅作用