2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、隨著納米科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展,各種各樣的納米材料被用于構(gòu)建非病毒基因載體。其中,具有熒光性能的基因載體因?yàn)槟軌蚴聚櫦?xì)胞內(nèi)基因運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)過程而倍受矚目。在基因運(yùn)輸?shù)倪^程中,長時程實(shí)時的示蹤成像可以讓人們更加綜合地理解基因載體的胞內(nèi)行為,進(jìn)而有利于更加合理地設(shè)計高性能的基因載體。近年來,零維熒光硅納米顆粒受到了人們的廣泛關(guān)注。因其具備優(yōu)越的光學(xué)性質(zhì)和良好的生物安全性,被認(rèn)為是生物成像應(yīng)用中潛在的理想熒光探針。
  在本文中,我們首先構(gòu)建

2、了一種基于熒光硅納米顆粒的基因載體,并成功將其應(yīng)用于基因運(yùn)輸和熒光生物成像。在DNA的負(fù)載和保護(hù)試驗(yàn)中,基于熒光硅納米顆粒的基因載體不僅具有相對較高的DNA負(fù)載率,而且能夠有效地保護(hù)DNA,避免DNA酶的降解。在基因轉(zhuǎn)染測試中,基于熒光硅納米顆粒的基因載體在人宮頸癌(HeLa)細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染效率約為35%,比相同條件下聚乙烯亞胺(Polyetherimide,PEI)的轉(zhuǎn)染效率要高?;跓晒夤杓{米顆粒的基因載體同時也具備良好的生物安全性

3、,在與HeLa細(xì)胞共孵育培養(yǎng)時間長達(dá)24和48小時的時間內(nèi),均未產(chǎn)生明顯的細(xì)胞毒性,HeLa細(xì)胞仍然維持90%以上的存活率。
  其次,通過追蹤熒光硅納米顆粒強(qiáng)而穩(wěn)定的熒光,我們長時程實(shí)時地研究了基因載體的胞內(nèi)行為(比如:細(xì)胞內(nèi)吞、胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)等),進(jìn)而揭示了基因載體與溶酶體的“復(fù)融合”(re-fusion)現(xiàn)象。我們選擇了另外一種典型的人乳腺癌(MCF-7)細(xì)胞作為對照組來研究載體的基因轉(zhuǎn)染和胞內(nèi)行為。基于熒光硅納米顆粒的載體在MC

4、F-7細(xì)胞中的基因轉(zhuǎn)染效率約為16%,比相同實(shí)驗(yàn)條件下HeLa細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率小的多。在活細(xì)胞長時程實(shí)時的示蹤成像中,MCF-7細(xì)胞中同樣存在基因載體與溶酶體的“復(fù)融合”現(xiàn)象。在相同的時間內(nèi)(15分鐘的實(shí)時示蹤成像),基因載體與溶酶體的“復(fù)融合”在MCF-7細(xì)胞中發(fā)生了3次,而在HeLa細(xì)胞中僅發(fā)生了1次。最后,通過進(jìn)一步分析此兩種細(xì)胞系的基因轉(zhuǎn)染效率和胞內(nèi)基因載體與溶酶體“復(fù)融合”現(xiàn)象之間的關(guān)系可知,“復(fù)融合”現(xiàn)象在基因轉(zhuǎn)染效率低的MC

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