肺淋巴循環(huán)在矽肺發(fā)病機制中的作用研究.pdf

1、目的：通過測定肺內(nèi)淋巴管增生及淋巴液、血清中硅元素含量的變化情況，分析肺淋巴循環(huán)與矽塵的排出及肺纖維化之間的關(guān)系，探討肺淋巴循環(huán)在矽肺發(fā)病機制中的可能作用及地位。
　　方法： SPF級成年雄性Wistar大鼠144只，按體重隨機分為正常對照組（8只/組）、治療對照組（8只/組）、染塵組及染塵治療組（按不同采樣時間分為8個亞組，8只/組）。染塵組大鼠非暴露式氣管內(nèi)注入1ml50g/L的矽塵混懸液，染塵后分為1d、3d、5d、7d、1

2、4d、28d、42d、56d等8個時間點處死后采樣；治療組除染塵外每日經(jīng)胃灌注銀杏葉混懸液10mg/100g，對照組中一組灌入生理鹽水，另一組灌入銀杏葉混懸液。收集各時間點大鼠淋巴液及血液，ICP-MS測定淋巴液及血清中硅元素水平；選取2只大鼠結(jié)扎其右肺，對左肺行墨汁-硝酸銀溶液灌注；其余大鼠處死后稱量肺濕重，取右下肺最大橫徑處組織用于石蠟包埋切片，經(jīng)HE、Masson及天狼猩紅-苦味酸染色檢測矽結(jié)節(jié)和Ⅰ、Ⅲ型膠原表達水平， Weste

3、rn blot檢測血管內(nèi)皮生長因子受體-3(VEGFR-3)蛋白的表達水平，試劑盒檢測羥脯氨酸表達水平。
　　結(jié)果：1 HE、Masson染色結(jié)果證實動物模型建立成功。2染塵組和染塵治療組肺組織中Ⅰ型膠原含量隨染塵時間的延長而持續(xù)性增加。與對照組相比，染塵組在7d、14d、28d、42d、56d時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，染塵治療組在14d、28d、42d、56d時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與染塵組相比

4、，各時間點染塵治療組Ⅰ型膠原含量均減少，14d、28d、42d、56d時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。3染塵組和染塵治療組肺組織中Ⅲ型膠原含量均先增高后降低。與對照組相比，染塵組和染塵治療組除1d外，其余時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與染塵組相比，各時間點染塵治療組Ⅲ型膠原含量均減少，7d、14d、28d、42d、56d時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。4染塵組和染塵治療組肺組織中羥脯氨酸含量均持續(xù)性增加。

5、與對照組相比，染塵組除1d、3d外，其余時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，染塵治療組除1d外，其余時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與染塵組相比，各時間點染塵治療組羥脯氨酸含量均減少，除1d、56d外，其余時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。5肺組織經(jīng)墨汁-硝酸銀溶液灌注后，對照組未發(fā)現(xiàn)明顯淋巴管增生，各時間點染塵組和染塵治療組血管周圍均存在不同程度的淋巴管增生。6染塵組和染塵治療組肺組織中VEGFR-3蛋白含量均

6、先增高后降低。與對照組相比，染塵組在7d、14d、28d、42d差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，染塵治療組在5d、7d、14d、28d、42d差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與染塵組相比，各時間點染塵治療組VEGFR-3蛋白含量均增加，7d、14d、28d、42d時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。7染塵組和染塵治療組淋巴液及血清中硅元素含量均先增高后降低。與對照組相比，染塵組和染塵治療組各時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0

7、.05)。與染塵組相比，染塵治療組淋巴液及血清中硅元素水平均相應(yīng)升高，各時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。8肺纖維化后期，染塵組和染塵治療組淋巴、血清中硅元素水平均與羥脯氨酸表達水平呈負相關(guān)(P＜0.05)，淋巴液、血清中硅元素水平均與VEGFR-3表達呈正相關(guān)(P＜0.05)， VEGFR-3與羥脯氨酸呈負相關(guān)(P＜0.05)。
　　結(jié)論：1肺纖維化過程中早期存在淋巴管的增生，后期淋巴增生減少，淋巴液及血清中硅元素水平下