兩株不動桿菌的分離鑒定、石油降解功能及生物學特性研究.pdf

1、隨著社會經(jīng)濟發(fā)展，人們對石油資源的需求量越來越大。在石油勘探、開采、運輸以及儲存過程中都存在不同程度的泄漏，對土壤造成嚴重污染。在眾多石油污染修復技術中微生物修復由于成本低、修復效果好、不易引起二次污染而得到了廣泛應用。目前微生物修復技術存在的主要問題之一是缺少高效、廣譜、穩(wěn)定、適應性強的菌種以及對修復技術的深入研究。
　　本論文采取油濃度梯度升高法，從不同地區(qū)石油污染土樣中分離出具有石油降解作用的菌株75株，選取其中兩株高效穩(wěn)定

2、的石油降解菌 JC3-1、YM122，通過形態(tài)特征觀察、結合細菌生理生化特征、16SrDNA序列分析初步確定JC3-1為嗜油不動桿菌(Acinetobacter oleivorans)，YM122為鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii)。
　　對菌株 JC3-1、YM122的生長特性進行了研究：菌株 JC3-1、YM122均在28h后進入生長穩(wěn)定期。JC3-1在溫度為20℃～40℃、pH5.0～9.0條件下

3、生長良好，耐鹽度為3％，且最適生長溫度30℃～40℃，最適初始pH為9.0，最適生長鹽濃度為0%；菌株 YM122在溫度為20℃～50℃、pH5.0～9.0條件下生長良好，耐鹽度為6%，最佳生長溫度為40℃，最適初始pH為6.0，最適生長鹽度1%。兩株菌具有較強的環(huán)境適應性。
　　采用重量法對兩株不動桿菌的石油降解率進行測定，在濃度為4000 mg/L石油培養(yǎng)基中生長15d，菌株 JC3-1對石油的降解率達42.15%，YM122

4、的降解率達63.44%。
　　采用凃板計數(shù)法研究菌株對不同有機物的利用情況，菌株JC3-1能夠利用一定濃度的正戊烷、正己烷、十六烷、十八烷、苯、甲苯、二甲苯、萘、鄰苯二酚、芘；菌株 YM122能夠利用一定濃度的十二烷、十六烷、十八烷、鄰苯二酚。通過對菌株十六烷的粘附測定發(fā)現(xiàn)：菌株 JC3-1對十六烷的粘附率為96.57%，YM122對十六烷的粘附率可達42.56%，遠高于大腸桿菌（E. co i l)3.10%。
　　PCR

5、擴增檢測到菌株 JC3-1與 YM122均具有烷烴單加氧酶(alkane monooxygenase)、芳烴雙加氧酶(aromatic-ring-hydroxylating dioxygenases)、聯(lián)苯雙加氧酶(b ip henyl d ioxygenase)、甲苯雙加氧酶(to luene d ioxyge nase)、鄰苯二酚雙加氧酶(catechol-2,3-dioxygenase)、萘雙加氧酶(naphthalene dio