產(chǎn)細菌素蠟樣芽孢桿菌的篩選、鑒定及培養(yǎng)基優(yōu)化.pdf

1、由于食品工業(yè)中廣泛使用的化學防腐劑引起的安全問題越來越多,人們開始尋找安全高效的新型防腐劑。細菌素是一類由細菌產(chǎn)生的抑菌物質(zhì),具有高效、無毒副作用、無殘留、無抗藥性等優(yōu)點,是近年來食品生物防腐劑研究的重點之一,同時也被認為是抗生素的最佳替代物。因此,本文主要的目的在于篩選出產(chǎn)細菌素的菌株,并對篩選出來的目的菌株的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件進行優(yōu)化,從而提高目的菌株產(chǎn)細菌素的量。
　　本文以金黃色葡萄球菌為指示菌,從土壤中分離篩選得到目的

2、菌株,命名為XH25。在排除有機酸與過氧化氫實驗以及蛋白酶K敏感試驗后綜合推測出菌株XH25的抑菌效果可能來源于細菌素。篩選得到的XH25菌株的各項生理生化測定結(jié)果顯示:革蘭氏染色試驗、過氧化氫酶試驗、淀粉水解試驗、硝酸還原試驗、酯酶試驗、M.R試驗、V.P試驗、卵磷脂酶水解試驗、酪素水解試驗和糖醇類發(fā)酵試驗都呈陽性,H2S試驗呈陰性;再結(jié)合菌株XH25的16S rRNA分子鑒定通過序列比對分析、系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建,鑒定出菌株XH25為蠟

3、樣芽孢桿菌。
　　采用 Plackett-Burman(簡稱 PB)試驗設計和響應面分析法(Response surface methodology,簡稱RSM)對菌株XH25的發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)化。先用Plackett-Burman試驗設計篩選出對細菌素產(chǎn)生有顯著影響的因素,確定影響細菌素產(chǎn)生的主要成分;然后通過最陡爬坡試驗找出RSM設計的中心點;最后利用RSM分析法對培養(yǎng)基進行優(yōu)化。優(yōu)化結(jié)果表明,培養(yǎng)基的最優(yōu)組合為:可溶性淀粉1