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1、蛋白質(zhì)-生物分子改造技術(shù)在很多領(lǐng)域有著重要的應(yīng)用。在實驗的第一部分,我們通過RAFT“后”聚合方法合成了帶有巰基噻唑啉末端基的聚乙二醇甲醚丙烯酸酯聚合物。隨后,把這一帶有功能性末端基的聚合物通過酰胺鍵連接在葡萄糖氧化酶表面,這一反應(yīng)是溫和而高效的。隨后通過分光光度法來測定標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖氧化酶以及改性后的酶活性。測定結(jié)果顯示,改性后的酶與標(biāo)準(zhǔn)酶相比活性有所降低,但是它的熱穩(wěn)定性以及儲存性得到了增強。
在實驗的第二部分,我們采用“
2、原位”RAFT聚合方法,高效而簡潔的制備了聚合物改性的葡萄糖氧化酶,它與第一部分的聚合方法相比,省去了提純步驟。首先,把帶有巰基噻唑啉末端基的RAFT試劑連接在酶表面,這一反應(yīng)通過紫外分光光度計得到了證明。隨后,在35℃水溶液中進(jìn)行RAFT聚合,把異丙基丙烯酰胺(NIPAAm)聚合物在酶的表面聚合。隨后通過聚丙烯酰胺凝膠電泳、紫外分光光度計以及動態(tài)光散射法測定。通過酶活性測試以及熱穩(wěn)定性分析,我們發(fā)現(xiàn),用聚異丙基丙烯酰胺改性后的葡萄糖氧
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